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B16-F10-Luc
Tecido
Pele
Doença
Melanoma do ratinho

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B16-F10-Luc

Cell line · Número do produto 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição

A B16-F10-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular de melanoma murino B16-F10, que foi originalmente estabelecida a partir de um melanoma espontâneo surgido num rato C57BL/6. A linha parental B16-F10 é amplamente utilizada na investigação do cancro devido ao seu elevado potencial metastático e à sua enxertia robusta e reprodutível em hospedeiros singénicos C57BL/6. Nas células B16-F10-Luc, um gene da luciferase foi integrado de forma estável sob o controlo de um promotor constitutivamente ativo (geralmente EF-1α ou CMV) por transdução lentiviral, resultando numa expressão estável e de alto nível da luciferase ao longo das passagens.

As células B16-F10-Luc emitem um sinal bioluminescente na presença de um substrato de luciferina, permitindo a imagiologia bioluminescente (BLI) in vivo, não invasiva e quantitativa, do crescimento, disseminação e metástase tumoral em animais vivos. A linha é adequada tanto para modelos subcutâneos como intravenosos (metástase experimental) em ratos C57BL/6, com colónias metastáticas a formarem-se preferencialmente nos pulmões. A emissão de luminescência é linearmente proporcional ao número de células viáveis, permitindo a monitorização longitudinal em tempo real da carga tumoral sem sacrifício de animais em cada ponto temporal. A expressão de luciferase não altera significativamente a cinética de crescimento in vitro ou in vivo das células B16-F10.

As principais aplicações incluem a avaliação de agentes antitumorais, imunoterapias e compostos inibidores de metástases em modelos singénicos, bem como a imagiologia farmacodinâmica quantitativa em estudos oncológicos pré-clínicos.

Tecido
Pele
Doença
Melanoma do ratinho

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Mistura de células fusiformes e epiteliais

04Identificadores

Referência
B16-F10-Luc (número de catálogo Cytion 305658)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Luc2 (firefly, com codões otimizados)
Produtos
Melanina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/6