B16-F10-Luc
Cell line · Numer produktu 305658
B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...
Dostosowanie / Zalecenia
- B16-F10-LucCell line€800.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
B16-F10-Luc to bioluminescencyjna odmiana mysiej linii komórkowej czerniaka B16-F10, która została pierwotnie wyhodowana z czerniaka spontanicznego powstałego u myszy C57BL/6. Macierzysta linia B16-F10 jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem ze względu na swój wysoki potencjał przerzutowy oraz silne i powtarzalne wszczepienie u syngenicznych gospodarzy C57BL/6. W komórkach B16-F10-Luc gen lucyferazy został stabilnie zintegrowany pod kontrolą konstytutywnie aktywnego promotora (zwykle EF-1α lub CMV) poprzez transdukcję lentiwirusową, co skutkuje wysokim poziomem stabilnej ekspresji lucyferazy w kolejnych pasażach.
Komórki B16-F10-Luc emitują sygnał bioluminescencyjny w obecności substratu lucyferyny, umożliwiając nieinwazyjne, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) wzrostu guza, rozprzestrzeniania się i przerzutów u żywych zwierząt. Linia ta nadaje się zarówno do modeli podskórnych, jak i dożylnych (przeniesienie eksperymentalne) u myszy C57BL/6, przy czym kolonie przerzutowe tworzą się preferencyjnie w płucach. Emisja luminescencji jest liniowo proporcjonalna do liczby żywych komórek, co pozwala na monitorowanie obciążenia nowotworowego w czasie rzeczywistym i w ujęciu podłużnym bez konieczności uśmiercania zwierząt w każdym punkcie czasowym. Ekspresja lucyferazy nie zmienia znacząco kinetyki wzrostu komórek B16-F10 in vitro ani in vivo.
Kluczowe zastosowania obejmują ocenę środków przeciwnowotworowych, immunoterapii i związków hamujących przerzuty w modelach syngenicznych, a także ilościowe obrazowanie farmakodynamiczne w przedklinicznych badaniach onkologicznych.
- Chusteczka
- Skóra
- Choroba
- Czerniak myszy
02Klasyfikacja
- Organizm
- Mysz
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Mieszanka komórek wrzecionowatych i nabłonkowych
04Identyfikatory
- Źródło
- B16-F10-Luc (numer katalogowy Cytion 305658)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_C8XU
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja antygenu
- Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)
- Produkty
- Melanina
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 1 do 3 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Rasa / podgatunek
- C57BL/6
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak


.jpg)
