Przejdź do treści
B16-F10-Luc
Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak myszy

Dokumenty

B16-F10-Luc

Cell line · Numer produktu 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

B16-F10-Luc to bioluminescencyjna odmiana mysiej linii komórkowej czerniaka B16-F10, która została pierwotnie wyhodowana z czerniaka spontanicznego powstałego u myszy C57BL/6. Macierzysta linia B16-F10 jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem ze względu na swój wysoki potencjał przerzutowy oraz silne i powtarzalne wszczepienie u syngenicznych gospodarzy C57BL/6. W komórkach B16-F10-Luc gen lucyferazy został stabilnie zintegrowany pod kontrolą konstytutywnie aktywnego promotora (zwykle EF-1α lub CMV) poprzez transdukcję lentiwirusową, co skutkuje wysokim poziomem stabilnej ekspresji lucyferazy w kolejnych pasażach.

Komórki B16-F10-Luc emitują sygnał bioluminescencyjny w obecności substratu lucyferyny, umożliwiając nieinwazyjne, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) wzrostu guza, rozprzestrzeniania się i przerzutów u żywych zwierząt. Linia ta nadaje się zarówno do modeli podskórnych, jak i dożylnych (przeniesienie eksperymentalne) u myszy C57BL/6, przy czym kolonie przerzutowe tworzą się preferencyjnie w płucach. Emisja luminescencji jest liniowo proporcjonalna do liczby żywych komórek, co pozwala na monitorowanie obciążenia nowotworowego w czasie rzeczywistym i w ujęciu podłużnym bez konieczności uśmiercania zwierząt w każdym punkcie czasowym. Ekspresja lucyferazy nie zmienia znacząco kinetyki wzrostu komórek B16-F10 in vitro ani in vivo.

Kluczowe zastosowania obejmują ocenę środków przeciwnowotworowych, immunoterapii i związków hamujących przerzuty w modelach syngenicznych, a także ilościowe obrazowanie farmakodynamiczne w przedklinicznych badaniach onkologicznych.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak myszy

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Mieszanka komórek wrzecionowatych i nabłonkowych

04Identyfikatory

Źródło
B16-F10-Luc (numer katalogowy Cytion 305658)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)
Produkty
Melanina

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/6