Prejsť na obsah
B16-F10-Luc
Tkanivo
Koža
Choroba
Myší melanóm

Dokumenty

B16-F10-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

B16-F10-Luc je bioluminiscenčný derivát myšieho melanómového bunkového radu B16-F10, ktorý bol pôvodne izolovaný zo spontánneho melanómu vzniknutého u myši C57BL/6. Rodičovský rad B16-F10 sa vďaka svojmu vysokému metastatickému potenciálu a spoľahlivému, reprodukovateľnému prihojeniu v syngénnych hostiteľoch C57BL/6 široko využíva vo výskume rakoviny. V bunkách B16-F10-Luc bol gén luciferázy stabilne integrovaný pod kontrolou konštitutívne aktívneho promotora (zvyčajne EF-1α alebo CMV) prostredníctvom lentivírusovej transdukcie, čo vedie k vysokej a stabilnej expresii luciferázy v priebehu pasáží.

Bunky B16-F10-Luc emitujú bioluminiscenčný signál v prítomnosti substrátu luciferínu, čo umožňuje neinvazívne, kvantitatívne in vivo bioluminiscenčné zobrazovanie (BLI) rastu nádoru, šírenia a metastázovania u živých zvierat. Táto línia je vhodná pre subkutánne aj intravenózne (experimentálne metastázy) modely u myší C57BL/6, pričom metastatické kolónie sa preferenčne tvoria v pľúcach. Výkon luminiscencie je lineárne úmerný počtu životaschopných buniek, čo umožňuje longitudinálne monitorovanie nádorovej záťaže v reálnom čase bez nutnosti usmrcovania zvierat v každom časovom bode. Expresia luciferázy významne nemení kinetiku rastu buniek B16-F10 in vitro ani in vivo.

Kľúčové aplikácie zahŕňajú hodnotenie protinádorových látok, imunoterapií a zlúčenín inhibujúcich metastázy v syngénnych modeloch, ako aj kvantitatívne farmakodynamické zobrazovanie v predklinických onkologických štúdiách.

Tkanivo
Koža
Choroba
Myší melanóm

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Zmes vretenovitých a epitelových buniek

04Identifikátory

Citácia
B16-F10-Luc (katalógové číslo Cytion 305658)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
Luc2 (svetluška, s optimalizovanými kodónmi)
Produkty
Melanín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6