B16-F10-Luc
Cell line · Productnummer 305658
B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...
Maatwerk / Aanbevelingen
- B16-F10-LucCell line€800.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
B16-F10-Luc is een bioluminescent derivaat van de B16-F10-muizenmelanoomcellijn, die oorspronkelijk is geïsoleerd uit een spontaan melanoom bij een C57BL/6-muis. De oorspronkelijke B16-F10-lijn wordt op grote schaal gebruikt in kankeronderzoek vanwege het hoge metastatische potentieel en de robuuste, reproduceerbare engraftment in syngene C57BL/6-gastheren. In B16-F10-Luc-cellen is een luciferase-gen stabiel geïntegreerd onder de controle van een constitutief actieve promotor (meestal EF-1α of CMV) door middel van lentivirale transductie, wat resulteert in een hoog niveau van stabiele luciferase-expressie over verschillende passages heen.
B16-F10-Luc-cellen zenden een bioluminescent signaal uit in aanwezigheid van een luciferinesubstraat, waardoor niet-invasieve, kwantitatieve in vivo bioluminescentiebeeldvorming (BLI) van tumorgroei, verspreiding en metastase in levende dieren mogelijk is. De lijn is geschikt voor zowel subcutane als intraveneuze (experimentele metastase) modellen in C57BL/6-muizen, waarbij metastatische kolonies zich bij voorkeur in de longen vormen. De luminescentie-output is lineair evenredig aan het aantal levensvatbare cellen, waardoor realtime, longitudinale monitoring van de tumorbelasting mogelijk is zonder dat dieren op elk tijdstip moeten worden geofferd. Luciferase-expressie verandert de in vitro of in vivo groeikinetiek van B16-F10-cellen niet significant.
Belangrijke toepassingen zijn onder meer de evaluatie van antitumormiddelen, immuuntherapieën en metastase-remmende verbindingen in syngene modellen, evenals kwantitatieve farmacodynamische beeldvorming in preklinische oncologische studies.
- Weefsel
- Huid
- Ziekte
- Muis melanoom
02Classificatie
- Organisme
- Muis
- Seks
- Man
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Mengsel van spoelvormige en epitheelachtige cellen
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- B16-F10-Luc (Cytion-catalogusnummer 305658)
- NCBI-belastingnummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_C8XU
05Expressie en vatbaarheid
- Antigeenexpressie
- Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)
- Producten
- Melanine
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Zaaidichtheid
- 1 tot 3 x 104 cellen/cm2
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Soort / ondersoort
- C57BL/6
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja


.jpg)
