Ga naar de inhoud
B16-F10-Luc
Weefsel
Huid
Ziekte
Muis melanoom

Documenten

B16-F10-Luc

Cell line · Productnummer 305658

B16-F10-Luc is a bioluminescent derivative of the B16-F10 murine melanoma cell line, which was originally established from a spontaneous melanoma arising ...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

B16-F10-Luc is een bioluminescent derivaat van de B16-F10-muizenmelanoomcellijn, die oorspronkelijk is geïsoleerd uit een spontaan melanoom bij een C57BL/6-muis. De oorspronkelijke B16-F10-lijn wordt op grote schaal gebruikt in kankeronderzoek vanwege het hoge metastatische potentieel en de robuuste, reproduceerbare engraftment in syngene C57BL/6-gastheren. In B16-F10-Luc-cellen is een luciferase-gen stabiel geïntegreerd onder de controle van een constitutief actieve promotor (meestal EF-1α of CMV) door middel van lentivirale transductie, wat resulteert in een hoog niveau van stabiele luciferase-expressie over verschillende passages heen.

B16-F10-Luc-cellen zenden een bioluminescent signaal uit in aanwezigheid van een luciferinesubstraat, waardoor niet-invasieve, kwantitatieve in vivo bioluminescentiebeeldvorming (BLI) van tumorgroei, verspreiding en metastase in levende dieren mogelijk is. De lijn is geschikt voor zowel subcutane als intraveneuze (experimentele metastase) modellen in C57BL/6-muizen, waarbij metastatische kolonies zich bij voorkeur in de longen vormen. De luminescentie-output is lineair evenredig aan het aantal levensvatbare cellen, waardoor realtime, longitudinale monitoring van de tumorbelasting mogelijk is zonder dat dieren op elk tijdstip moeten worden geofferd. Luciferase-expressie verandert de in vitro of in vivo groeikinetiek van B16-F10-cellen niet significant.

Belangrijke toepassingen zijn onder meer de evaluatie van antitumormiddelen, immuuntherapieën en metastase-remmende verbindingen in syngene modellen, evenals kwantitatieve farmacodynamische beeldvorming in preklinische oncologische studies.

Weefsel
Huid
Ziekte
Muis melanoom

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Mengsel van spoelvormige en epitheelachtige cellen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
B16-F10-Luc (Cytion-catalogusnummer 305658)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_C8XU

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)
Producten
Melanine

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
C57BL/6