Przejdź do treści
HEL 92.1.7
Chusteczka
Szpik kostny
Choroba
Erytroleukemia
Synonimy
HEL92.1.7, HEL-92.1.7, HEL-92-1-7, HEL-92_1_7, HEL-92, HEL92

Dokumenty

HEL 92.1.7

Cell line · Numer produktu 300462

The HEL 92.1.7 cell line exhibits the capacity for spontaneous differentiation into erythroblast-like cells, mimicking some aspects of erythroid maturatio...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HEL 92.1.7 wykazuje zdolność do spontanicznego różnicowania się w komórki erytroblastopodobne, naśladując niektóre aspekty dojrzewania erytroidalnego in vitro. Ta cecha sprawia, że są one szczególnie przydatne do badania procesu różnicowania erytroidalnego i regulacji ekspresji genów związanych z erytropoezą. Ich zdolność do spontanicznego różnicowania zapewnia wyjątkową przewagę w badaniu wewnętrznych szlaków i mechanizmów, które napędzają dojrzewanie prekursorów erytroidalnych bez dodawania zewnętrznych czynników indukujących różnicowanie.

Co więcej, różnicowaniem komórek HEL 92.1.7 można dalej manipulować poprzez dodanie estrów forbolu, takich jak TPA (12-O-tetradekanoilo-forbol-13-octan) i PMA (kwas foliowy mirystynowy), o których wiadomo, że indukują różnicowanie podobne do makrofagów. To indukowane różnicowanie w komórki podobne do makrofagów rozszerza użyteczność linii komórkowej HEL 92.1.7 poza badania erytroidalne, umożliwiając naukowcom zbadanie i zrozumienie plastyczności komórek krwiotwórczych oraz warunków, w których zaangażowanie linii i tożsamość komórkowa mogą zostać przekierowane. Takie badania mają kluczowe znaczenie dla opracowania strategii terapeutycznych mających na celu manipulowanie losem komórek w medycynie regeneracyjnej i leczeniu raka.

Chusteczka
Szpik kostny
Choroba
Erytroleukemia
Synonimy
  • HEL92.1.7
  • HEL-92.1.7
  • HEL-92-1-7
  • HEL-92_1_7
  • HEL-92
  • HEL92

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Okrągłe komórki
Typ komórki
Erytroblast

04Identyfikatory

Źródło
HEL 92.1.7 (numer katalogowy Cytion 300462)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2481

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
HLA A3, Aw32, Bw35, Ia+
Produkty
Hemoglobina, globina (łańcuchy G gamma, A gamma, epsilon, zeta i alfa), beta-2-mikroglobulina, glikoforyna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS inaktywowanym termicznie
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
30 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski