Mine otse sisu juurde
HEL 92.1.7
Kude
Luuüdi
Haigus
Erütroleukeemia
Sünonüümid
HEL92.1.7, HEL-92.1.7, HEL-92-1-7, HEL-92_1_7, HEL-92, HEL92

Dokumendid

HEL 92.1.7

Cell line · Toote number 300462

The HEL 92.1.7 cell line exhibits the capacity for spontaneous differentiation into erythroblast-like cells, mimicking some aspects of erythroid maturatio...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HEL 92.1.7 rakuliinil on võime spontaanselt diferentseeruda erütrooblastide sarnasteks rakkudeks, jäljendades mõningaid aspekte erütrooidide küpsemisest in vitro. See omadus muudab need eriti kasulikuks erütrooidse diferentseerumise protsessi ja erütropoeesiga seotud geeniekspressiooni reguleerimise uurimiseks. Nende võime spontaanselt diferentseeruda annab ainulaadse eelise erütrooidsete eellaste küpsemist juhtivate sisemiste radade ja mehhanismide uurimiseks ilma väliste diferentseerumist esilekutsuvate ainete lisamiseta.

Lisaks sellele saab HEL 92.1.7 rakkude diferentseerumist täiendavalt manipuleerida forbolestrite, nagu TPA (12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate) ja PMA (phorbol myristic acid) lisamisega, mis teadaolevalt indutseerivad makrofaagilaadset diferentseerumist. Selline indutseeritud diferentseerumine makrofaagilaadseks rakuks laiendab HEL 92.1.7 rakuliini kasutusvõimalusi lisaks erütroidi uuringutele, võimaldades teadlastel uurida ja mõista vereloome rakkude plastilisust ja tingimusi, mille korral saab liinide sidumist ja rakuidentiteeti ümber suunata. Sellised uuringud on olulised terapeutiliste strateegiate väljatöötamiseks, mille eesmärk on manipuleerida rakkude saatust regeneratiivse meditsiini ja vähiravi eesmärgil.

Kude
Luuüdi
Haigus
Erütroleukeemia
Sünonüümid
  • HEL92.1.7
  • HEL-92.1.7
  • HEL-92-1-7
  • HEL-92_1_7
  • HEL-92
  • HEL92

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Rakutüüp
Erütroblast

04Tunnused

Viide
HEL 92.1.7 (Cytioni katalooginumber 300462)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2481

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HLA A3, Aw32, Bw35, Ia+
Tooted
Hemoglobiin, globiin (G-gamma-, A-gamma-, epsilon-, zeta- ja alfaahelad), beeta-2-mikroglobuliin, glükofooriin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
30 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia