Pāriet uz saturu
HEL 92.1.7
Audums
Kaulu smadzenes
Slimība
Eritoleikēmija
Sinonīmi
HEL92.1.7, HEL-92.1.7, HEL-92-1-7, HEL-92_1_7, HEL-92, HEL92

Dokumenti

HEL 92.1.7

Cell line · Preces numurs 300462

The HEL 92.1.7 cell line exhibits the capacity for spontaneous differentiation into erythroblast-like cells, mimicking some aspects of erythroid maturatio...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HEL 92.1.7 šūnu līnija spēj spontāni diferencēties par eritroblastiem līdzīgām šūnām, atdarinot dažus eritroīdu nobriešanas aspektus in vitro. Šī īpašība padara tās īpaši noderīgas eritroīdu diferenciācijas procesa un ar eritropoēzi saistīto gēnu ekspresijas regulācijas izpētei. To spēja spontāni diferencēties ir unikāla priekšrocība, lai pētītu iekšējos ceļus un mehānismus, kas nosaka eritroīdu prekursoru nobriešanu, nepievienojot ārējus diferenciāciju veicinošus aģentus.

Turklāt HEL 92.1.7 šūnu diferenciāciju var vēl vairāk manipulēt, pievienojot tādus forbolu esterus kā TPA (12-O-tetradekanoil-forbol-13-acetāts) un PMA (forbolu miristīnskābe), kas, kā zināms, inducē makrofāgiem līdzīgu diferenciāciju. Šī inducētā diferenciācija par makrofāgiem līdzīgām šūnām paplašina HEL 92.1.7 šūnu līnijas pielietojumu ārpus eritroīdu pētījumiem, ļaujot pētniekiem izpētīt un izprast hematopoētisko šūnu plastiskumu un apstākļus, kādos var mainīt šūnu līnijas un šūnu identitāti. Šādi pētījumi ir ļoti svarīgi, lai izstrādātu terapeitiskās stratēģijas, kuru mērķis ir manipulēt ar šūnu likteni reģeneratīvās medicīnas un vēža ārstēšanas vajadzībām.

Audums
Kaulu smadzenes
Slimība
Eritoleikēmija
Sinonīmi
  • HEL92.1.7
  • HEL-92.1.7
  • HEL-92-1-7
  • HEL-92_1_7
  • HEL-92
  • HEL92

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas
Šūnu tips
Eritroblasts

04Identifikatori

Atsauce
HEL 92.1.7 (Cytion kataloga numurs 300462)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2481

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HLA A3, Aw32, Bw35, Ia+
Produkti
Hemoglobīns, globīns (G gamma, A gamma, epsilona, zeta un alfa ķēdes), beta-2-mikroglobulīns, glikoforīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
30 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis