Przejdź do treści
HepG2.2.15
Chusteczka
Wątroba
Choroba
Hepatoblastoma
Synonimy
HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15

Dokumenty

HepG2.2.15

Cell line · Numer produktu 305227

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HepG2.2.15 jest pochodną linii komórkowej HepG2, która pochodzi z ludzkiego hepatoblastoma, rodzaju raka wątroby. Komórki te są szczególnie godne uwagi ze względu na ich zdolność do stabilnej ekspresji cząsteczek wirusa zapalenia wątroby typu B (HBV), co czyni je nieocenionymi w badaniu biologii HBV i opracowywaniu leków przeciwwirusowych. Komórki HepG2.2.15 zachowują wiele cech hepatocytów, w tym produkcję białek, takich jak albumina i alfa-fetoproteina, które są krytyczne dla funkcjonowania wątroby. Dodatkowo, mają one wielokątny kształt i tworzą ciasne skupiska, przypominające strukturę tkanki wątroby.

Jednym z głównych zastosowań linii komórkowej HepG2.2.15 jest badanie replikacji i patogenezy wirusa HBV. Komórki te są transfekowane genomem HBV, co prowadzi do ciągłej produkcji cząstek wirusa. Ta cecha czyni je idealnym modelem do badania cyklu życia wirusa HBV i wpływu różnych środków przeciwwirusowych. Naukowcy wykorzystują komórki HepG2.2.15 do badań przesiewowych pod kątem potencjalnych związków terapeutycznych, badania mechanizmów wejścia i replikacji wirusa oraz zrozumienia odpowiedzi immunologicznej gospodarza na zakażenie HBV. Zdolność linii komórkowej do produkcji HBV pozwala również na badanie mutacji wirusowych i wzorców oporności, co ma kluczowe znaczenie dla opracowania skutecznych metod leczenia.

Chusteczka
Wątroba
Choroba
Hepatoblastoma
Synonimy
  • HEP-G2/2.2.15
  • Hep-G2/2215
  • HepG2/2215
  • HepG2-2.2.15
  • HepG2 2.2.15
  • HepG/2.2.15
  • HepG2(2.2.15)
  • 2.2.15

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Identyfikatory

Źródło
HepG2.2.15 (numer katalogowy Cytion 305227)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_L855

04Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Pożywka Ham's F12K, w: 2,0 mM L-glutamina, w: 2,0 mM pirogronian sodu, w: 2,5 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820608a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
5 x 104 komórek/cm2
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

06Darczyńca

Wiek dawcy
15 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski

08Szczegóły produktu

Tabela składu