
- Tessuto
- Fegato
- Malattia
- Epatoblastoma
- Sinonimi
- HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15
Documenti
HepG2.2.15
Cell line · Codice prodotto 305227
Personalizzazione / Suggerimenti
- HepG2.2.15Cell line€550.00
01Informazioni generali
- Descrizione
La linea cellulare HepG2.2.15 è un derivato della linea cellulare HepG2, che deriva da un epatoblastoma umano, un tipo di cancro al fegato. Queste cellule sono particolarmente degne di nota per la loro capacità di esprimere stabilmente le particelle del virus dell'epatite B (HBV), il che le rende preziose nello studio della biologia dell'HBV e nello sviluppo di farmaci antivirali. Le cellule HepG2.2.15 mantengono molte delle caratteristiche degli epatociti, compresa la produzione di proteine come l'albumina e l'alfa-fetoproteina, fondamentali per la funzione epatica. Inoltre, hanno una forma poligonale e formano ammassi stretti, che ricordano la struttura del tessuto epatico.
Uno degli usi principali della linea cellulare HepG2.2.15 è la ricerca sulla replicazione e sulla patogenesi dell'HBV. Queste cellule sono trasfettate con il genoma dell'HBV e producono continuamente particelle virali. Questa caratteristica le rende un modello ideale per studiare il ciclo di vita dell'HBV e gli effetti di vari agenti antivirali. I ricercatori utilizzano le cellule HepG2.2.15 per lo screening di potenziali composti terapeutici, per studiare i meccanismi di ingresso e replicazione virale e per comprendere la risposta immunitaria dell'ospite all'infezione da HBV. La capacità della linea cellulare di produrre HBV consente anche di studiare le mutazioni virali e i modelli di resistenza, fondamentali per sviluppare trattamenti efficaci.
- Tessuto
- Fegato
- Malattia
- Epatoblastoma
- Sinonimi
- HEP-G2/2.2.15
- Hep-G2/2215
- HepG2/2215
- HepG2-2.2.15
- HepG2 2.2.15
- HepG/2.2.15
- HepG2(2.2.15)
- 2.2.15
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 2
03Identificatori
- Riferimento bibliografico
- HepG2.2.15 (numero di catalogo Cytion 305227)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_L855
04Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutammina, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,5 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820608a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- 5 x 104 cellule/cm2
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
06Donatore
- Età dei donatori
- 15 anni
- Etnia
- Caucasico
07Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì
08Dettagli sul prodotto
- Tabella delle composizioni