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HepG2.2.15
Tessuto
Fegato
Malattia
Epatoblastoma
Sinonimi
HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15

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HepG2.2.15

Cell line · Codice prodotto 305227

€550.00IVA e spese di spedizione escluse
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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HepG2.2.15 è un derivato della linea cellulare HepG2, che deriva da un epatoblastoma umano, un tipo di cancro al fegato. Queste cellule sono particolarmente degne di nota per la loro capacità di esprimere stabilmente le particelle del virus dell'epatite B (HBV), il che le rende preziose nello studio della biologia dell'HBV e nello sviluppo di farmaci antivirali. Le cellule HepG2.2.15 mantengono molte delle caratteristiche degli epatociti, compresa la produzione di proteine come l'albumina e l'alfa-fetoproteina, fondamentali per la funzione epatica. Inoltre, hanno una forma poligonale e formano ammassi stretti, che ricordano la struttura del tessuto epatico.

Uno degli usi principali della linea cellulare HepG2.2.15 è la ricerca sulla replicazione e sulla patogenesi dell'HBV. Queste cellule sono trasfettate con il genoma dell'HBV e producono continuamente particelle virali. Questa caratteristica le rende un modello ideale per studiare il ciclo di vita dell'HBV e gli effetti di vari agenti antivirali. I ricercatori utilizzano le cellule HepG2.2.15 per lo screening di potenziali composti terapeutici, per studiare i meccanismi di ingresso e replicazione virale e per comprendere la risposta immunitaria dell'ospite all'infezione da HBV. La capacità della linea cellulare di produrre HBV consente anche di studiare le mutazioni virali e i modelli di resistenza, fondamentali per sviluppare trattamenti efficaci.

Tessuto
Fegato
Malattia
Epatoblastoma
Sinonimi
  • HEP-G2/2.2.15
  • Hep-G2/2215
  • HepG2/2215
  • HepG2-2.2.15
  • HepG2 2.2.15
  • HepG/2.2.15
  • HepG2(2.2.15)
  • 2.2.15

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Identificatori

Riferimento bibliografico
HepG2.2.15 (numero di catalogo Cytion 305227)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_L855

04Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutammina, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,5 g/L NaHCO3 (articolo Cytion numero 820608a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
5 x 104 cellule/cm2
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

06Donatore

Età dei donatori
15 anni
Etnia
Caucasico

08Dettagli sul prodotto

Tabella delle composizioni