Siirry sisältöön
HepG2.2.15
Kudos
Maksa
Sairaus
Hepatoblastooma
Synonyymit
HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15

Asiakirjat

HepG2.2.15

Cell line · Tuotenumero 305227

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HepG2.2.15-solulinja on johdannainen HepG2-solulinjasta, joka on peräisin ihmisen maksasyöpätyypin hepatoblastoomasta. Nämä solut ovat erityisen merkittäviä, koska ne kykenevät ilmentämään vakaasti hepatiitti B -viruksen (HBV) partikkeleita, mikä tekee niistä korvaamattomia HBV:n biologian tutkimisessa ja viruslääkkeiden kehittämisessä. HepG2.2.15-solut säilyttävät monia hepatosyyttien ominaisuuksia, mukaan lukien maksan toiminnan kannalta kriittisten proteiinien, kuten albumiinin ja alfa-fetoproteiinin, tuotanto. Lisäksi niillä on monikulmainen muoto ja ne muodostavat tiiviitä klustereita, jotka muistuttavat maksakudoksen rakennetta.

Yksi HepG2.2.15-solulinjan ensisijaisista käyttötarkoituksista on HBV:n replikaation ja patogeneesin tutkiminen. Nämä solut transfektoidaan HBV-genomilla, mikä johtaa virushiukkasten jatkuvaan tuotantoon. Tämä ominaisuus tekee niistä ihanteellisen mallin HBV:n elinkaaren ja erilaisten viruslääkkeiden vaikutusten tutkimiseen. Tutkijat käyttävät HepG2.2.15-soluja potentiaalisten terapeuttisten yhdisteiden seulontaan, viruksen sisäänpääsy- ja replikaatiomekanismien tutkimiseen ja isännän immuunivasteen ymmärtämiseen HBV-infektiolle. Solulinjan kyky tuottaa HBV:tä mahdollistaa myös viruksen mutaatioiden ja resistenssimallien tutkimisen, mikä on ratkaisevan tärkeää tehokkaiden hoitojen kehittämiseksi.

Kudos
Maksa
Sairaus
Hepatoblastooma
Synonyymit
  • HEP-G2/2.2.15
  • Hep-G2/2215
  • HepG2/2215
  • HepG2-2.2.15
  • HepG2 2.2.15
  • HepG/2.2.15
  • HepG2(2.2.15)
  • 2.2.15

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
2

03Tunnisteet

Lähdeviite
HepG2.2.15 (Cytionin luettelonumero 305227)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_L855

04Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiinia, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820608a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
5 x 104 solua/cm2
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

06Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
15 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen

08Tuotetiedot

Koostumustaulukko