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HepG2.2.15
Tecido
Fígado
Doença
Hepatoblastoma
Sinónimos
HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15

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HepG2.2.15

Cell line · Número do produto 305227

€550.00sem impostos nem portes de envio
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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular HepG2.2.15 é um derivado da linha celular HepG2, que tem origem num hepatoblastoma humano, um tipo de cancro do fígado. Estas células são particularmente notáveis pela sua capacidade de exprimir de forma estável partículas do vírus da hepatite B (VHB), o que as torna inestimáveis no estudo da biologia do VHB e no desenvolvimento de medicamentos antivirais. As células HepG2.2.15 mantêm muitas das caraterísticas dos hepatócitos, incluindo a produção de proteínas como a albumina e a alfa-fetoproteína, que são essenciais para a função hepática. Além disso, possuem uma forma poligonal e formam aglomerados apertados, assemelhando-se à estrutura do tecido hepático.

Uma das principais utilizações da linha celular HepG2.2.15 é a investigação da replicação e patogénese do VHB. Estas células são transfectadas com o genoma do VHB, o que leva à produção contínua de partículas virais. Esta caraterística torna-as um modelo ideal para estudar o ciclo de vida do VHB e os efeitos de vários agentes antivirais. Os investigadores utilizam as células HepG2.2.15 para analisar potenciais compostos terapêuticos, investigar os mecanismos de entrada e replicação do vírus e compreender a resposta imunitária do hospedeiro à infeção pelo VHB. A capacidade da linha celular para produzir HBV também permite o estudo de mutações virais e padrões de resistência, o que é crucial para o desenvolvimento de tratamentos eficazes.

Tecido
Fígado
Doença
Hepatoblastoma
Sinónimos
  • HEP-G2/2.2.15
  • Hep-G2/2215
  • HepG2/2215
  • HepG2-2.2.15
  • HepG2 2.2.15
  • HepG/2.2.15
  • HepG2(2.2.15)
  • 2.2.15

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
2

03Identificadores

Referência
HepG2.2.15 (número de catálogo Cytion 305227)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_L855

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12K Medium, com: 2,0 mM L-Glutamina, com: 2,0 mM Piruvato de sódio, com: 2,5 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820608a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
5 x 104 células/cm2
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

06Doador

Idade do dador
15 anos
Etnia
Caucasiano

08Detalhes do produto

Tabela de composição