Mine otse sisu juurde
HepG2.2.15
Kude
Maksa
Haigus
Hepatoblastoom
Sünonüümid
HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15

Dokumendid

HepG2.2.15

Cell line · Toote number 305227

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HepG2.2.15 rakuliin on inimese hepatoblastoomist (maksavähi tüüp) pärineva HepG2 rakuliini derivaat. Need rakud on eriti tähelepanuväärsed oma võime poolest ekspresseerida stabiilselt B-hepatiidi viiruse (HBV) osakesi, mis muudab nad hindamatuks HBV bioloogia uurimisel ja viirusevastaste ravimite väljatöötamisel. HepG2.2.15 rakud säilitavad paljud hepatotsüütide omadused, sealhulgas selliste valkude nagu albumiin ja alfa-fetoproteiin, mis on maksafunktsiooni jaoks kriitilise tähtsusega, tootmise. Lisaks sellele on neil hulknurkne kuju ja nad moodustavad tihedaid klastreid, mis meenutavad maksakoe struktuuri.

HepG2.2.15 rakuliini üks peamisi kasutusalasid on HBV replikatsiooni ja patogeneesi uurimine. Need rakud transfekteeritakse HBV genoomiga, mis viib viiruse osakeste pideva tootmiseni. See omadus teeb neist ideaalse mudeli HBV elutsükli ja erinevate viirusevastaste ainete mõju uurimiseks. Teadlased kasutavad HepG2.2.15 rakke potentsiaalsete terapeutiliste ühendite sõelumiseks, viiruse sisenemise ja replikatsiooni mehhanismide uurimiseks ning peremeesorganismi immuunvastuse mõistmiseks HBV-infektsioonile. Rakuliini võime toota HBV-d võimaldab uurida ka viiruse mutatsioone ja resistentsuse mustreid, mis on tõhusa ravi väljatöötamiseks väga oluline.

Kude
Maksa
Haigus
Hepatoblastoom
Sünonüümid
  • HEP-G2/2.2.15
  • Hep-G2/2215
  • HepG2/2215
  • HepG2-2.2.15
  • HepG2 2.2.15
  • HepG/2.2.15
  • HepG2(2.2.15)
  • 2.2.15

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Tunnused

Viide
HepG2.2.15 (Cytioni katalooginumber 305227)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_L855

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820608a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
5 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Doonori vanus
15 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia

08Toote üksikasjad

Koostis tabel