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HepG2.2.15
Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatoblastom
Synonyme
HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15

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HepG2.2.15

Cell line · Artikelnummer 305227

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HepG2.2.15-Zelllinie ist ein Derivat der HepG2-Zelllinie, die aus einem menschlichen Hepatoblastom, einer Art von Leberkrebs, hervorgegangen ist. Diese Zellen zeichnen sich besonders durch ihre Fähigkeit aus, Hepatitis-B-Virus (HBV)-Partikel stabil zu exprimieren, was sie für die Erforschung der HBV-Biologie und die Entwicklung antiviraler Medikamente unersetzlich macht. HepG2.2.15-Zellen weisen viele Merkmale von Hepatozyten auf, darunter die Produktion von Proteinen wie Albumin und Alpha-Fetoprotein, die für die Leberfunktion entscheidend sind. Darüber hinaus besitzen sie eine polygonale Form und bilden enge Cluster, die der Struktur des Lebergewebes ähneln.

Die Zelllinie HepG2.2.15 wird in erster Linie für die Erforschung der HBV-Replikation und -Pathogenese verwendet. Diese Zellen sind mit dem HBV-Genom transfiziert, was zu einer kontinuierlichen Produktion von Viruspartikeln führt. Diese Eigenschaft macht sie zu einem idealen Modell für die Untersuchung des Lebenszyklus von HBV und der Auswirkungen verschiedener antiviraler Mittel. Forscher nutzen HepG2.2.15-Zellen, um nach potenziellen therapeutischen Wirkstoffen zu suchen, die Mechanismen des viralen Eintritts und der Replikation zu untersuchen und die Immunantwort des Wirts auf eine HBV-Infektion zu verstehen. Die Fähigkeit der Zelllinie, HBV zu produzieren, ermöglicht auch die Untersuchung von viralen Mutationen und Resistenzmustern, was für die Entwicklung wirksamer Behandlungen entscheidend ist.

Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatoblastom
Synonyme
  • HEP-G2/2.2.15
  • Hep-G2/2215
  • HepG2/2215
  • HepG2-2.2.15
  • HepG2 2.2.15
  • HepG/2.2.15
  • HepG2(2.2.15)
  • 2.2.15

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Bezeichner

Quellenangabe
HepG2.2.15 (Cytion Katalognummer 305227)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_L855

04Handhabung und Kultur

Nährmedium
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820608a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
5 x 104 Zellen/cm²
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

06Spender

Alter des Spenders
15 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch

08Produktdetails

Zusammensetzungstabelle