Pāriet uz saturu
HepG2.2.15
Audums
Aknas
Slimība
Hepatoblastoma
Sinonīmi
HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15

Dokumenti

HepG2.2.15

Cell line · Preces numurs 305227

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HepG2.2.15 šūnu līnija ir atvasinājums no HepG2 šūnu līnijas, kas iegūta no cilvēka hepatoblastomas - aknu vēža veida. Šīs šūnas ir īpaši ievērības cienīgas ar to spēju stabili ekspresēt B hepatīta vīrusa (HBV) daļiņas, kas padara tās nenovērtējamas HBV bioloģijas pētījumos un pretvīrusu zāļu izstrādē. HepG2.2.15 šūnas saglabā daudzas hepatocītu īpašības, tostarp tādu olbaltumvielu kā albumīns un alfa-fetoproteīns, kas ir ļoti svarīgas aknu darbībai, ražošanu. Turklāt tām piemīt daudzstūra forma un tās veido ciešus kopumus, kas atgādina aknu audu struktūru.

Viens no galvenajiem HepG2.2.15 šūnu līnijas izmantošanas veidiem ir HBV replikācijas un patoģenēzes pētījumi. Šīs šūnas tiek transficētas ar HBV genomu, kā rezultātā nepārtraukti veidojas vīrusa daļiņas. Šī īpašība padara tās par ideālu modeli HBV dzīves cikla un dažādu pretvīrusu līdzekļu iedarbības izpētei. Pētnieki izmanto HepG2.2.15 šūnas, lai veiktu potenciālo terapeitisko savienojumu skrīningu, pētītu vīrusa iekļūšanas un replikācijas mehānismus un izprastu saimnieka imūnsistēmas reakciju uz HBV infekciju. Šūnu līnijas spēja producēt HBV ļauj arī pētīt vīrusa mutācijas un rezistences modeļus, kas ir ļoti svarīgi, lai izstrādātu efektīvus ārstēšanas līdzekļus.

Audums
Aknas
Slimība
Hepatoblastoma
Sinonīmi
  • HEP-G2/2.2.15
  • Hep-G2/2215
  • HepG2/2215
  • HepG2-2.2.15
  • HepG2 2.2.15
  • HepG/2.2.15
  • HepG2(2.2.15)
  • 2.2.15

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Identifikatori

Atsauce
HepG2.2.15 (Cytion kataloga numurs 305227)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_L855

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12K barotne, w: 2,0 mM L-glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820608a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
5 x 104 šūnas/cm2
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

06Ziedotājs

Donora vecums
15 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis

08Informācija par produktu

Sastāva tabula