Gå til innholdet
HepG2.2.15
Vev
Lever
Sykdom
Hepatoblastom
Synonymer
HEP-G2/2.2.15, Hep-G2/2215, HepG2/2215, HepG2-2.2.15, HepG2 2.2.15, HepG/2.2.15, HepG2(2.2.15), 2.2.15

Dokumenter

HepG2.2.15

Cell line · Produktnummer 305227

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HepG2.2.15-cellelinjen er et derivat av HepG2-cellelinjen, som stammer fra et humant hepatoblastom, en type leverkreft. Disse cellene er spesielt bemerkelsesverdige for sin evne til å uttrykke hepatitt B-virus (HBV)-partikler stabilt, noe som gjør dem uvurderlige i studier av HBV-biologi og utvikling av antivirale legemidler. HepG2.2.15-celler har mange av hepatocyttenes egenskaper, blant annet produksjon av proteiner som albumin og alfa-fetoprotein, som er avgjørende for leverfunksjonen. I tillegg har de en polygonal form og danner tette klynger, noe som minner om levervevets struktur.

HepG2.2.15-cellelinjen brukes først og fremst til å forske på HBV-replikasjon og -patogenese. Disse cellene er transfektert med HBV-genomet, noe som fører til kontinuerlig produksjon av viruspartikler. Dette gjør dem til en ideell modell for å studere HBVs livssyklus og effekten av ulike antivirale midler. Forskere bruker HepG2.2.15-celler til å screene for potensielle terapeutiske forbindelser, undersøke mekanismer for virusets inntreden og replikasjon, og forstå vertens immunrespons på HBV-infeksjon. Cellelinjens evne til å produsere HBV gjør det også mulig å studere virusmutasjoner og resistensmønstre, noe som er avgjørende for å utvikle effektive behandlinger.

Vev
Lever
Sykdom
Hepatoblastom
Synonymer
  • HEP-G2/2.2.15
  • Hep-G2/2215
  • HepG2/2215
  • HepG2-2.2.15
  • HepG2 2.2.15
  • HepG/2.2.15
  • HepG2(2.2.15)
  • 2.2.15

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
2

03Identifikatorer

Kildehenvisning
HepG2.2.15 (Cytion katalognummer 305227)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_L855

04Håndtering og kultur

Næringsmedium
Ham's F12K Medium, m: 2,0 mM L-Glutamin, m: 2,0 mM Natriumpyruvat, m: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820608a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
5 x 104 celler/cm2
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

06Donor

Donorens alder
15 år
Etnisitet
Kaukasisk

08Produktdetaljer

Sammensetningstabell