Przejdź do treści
MH-3924A
Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy
Synonimy
MH 3924A, MH3924A, MH-3924 A, MH 3924 A, 3924A, Morris hepatoma 3924A, MH-3924, MH3924, MH 3924

Dokumenty

MH-3924A

Cell line · Numer produktu 500286

The MH3924A cell line is a well-characterized model derived from Morris rat hepatoma 3924A, which is frequently used in research to study hepatocellular c...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MH3924A jest dobrze scharakteryzowanym modelem pochodzącym od szczurzego wątrobiaka Morrisa 3924A, który jest często wykorzystywany w badaniach nad rakiem wątrobowokomórkowym (HCC). Komórki te zostały szeroko wykorzystane do zbadania mechanizmów leżących u podstaw wzrostu HCC, przerzutów i odpowiedzi terapeutycznych. W szczególności, komórki MH3924A są znane ze swojej silnej zdolności proliferacyjnej i zdolności do inwazji otaczających tkanek, co czyni je odpowiednim modelem in vitro i in vivo do badania progresji raka i potencjalnych metod leczenia.

Badania wykazały, że na proliferację i inwazyjność komórek MH3924A mogą znacząco wpływać różne czynniki. Na przykład wykazano, że leczenie lekiem immunosupresyjnym takrolimusem (FK506) promuje proliferację tych komórek, zwiększa ich potencjał inwazyjny i zwiększa ekspresję kluczowych cząsteczek zaangażowanych w przerzuty, takich jak CXCR4 i jego ligand SDF-1α. Wpływ FK506 na te komórki podkreśla jego potencjał do zaostrzania progresji raka, szczególnie w kontekście immunosupresji po przeszczepie, gdzie jego stosowanie jest powszechne w celu zapobiegania odrzuceniu narządu, ale może nieumyślnie promować wzrost guza.

Dodatkowo, komórki MH3924A zostały genetycznie zmodyfikowane w celu ekspresji ludzkiego symportera sodowo-jodkowego (hNIS), co znacznie zwiększa ich zdolność do wychwytu jodków. Modyfikacja ta ułatwiła wykorzystanie tych komórek w badaniach nad terapią radiojodem, zapewniając wgląd w potencjalne zastosowanie terapii genowej w leczeniu HCC. Jednak pomimo zwiększonego wychwytu, szybki wypływ jodku z komórek sugeruje, że konieczne są dalsze modyfikacje lub leczenie skojarzone, aby zatrzymać radioaktywność w komórkach nowotworowych w celu skutecznej terapii. Linia komórkowa MH3924A pozostaje zatem kluczowym modelem zarówno w podstawowych, jak i stosowanych badaniach nad rakiem, szczególnie w badaniach molekularnych podstaw HCC i strategii terapeutycznych.

Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy
Synonimy
  • MH 3924A
  • MH3924A
  • MH-3924 A
  • MH 3924 A
  • 3924A
  • Morris hepatoma 3924A
  • MH-3924
  • MH3924
  • MH 3924

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, w ACI-rat
Czas podwojenia
25 do 35 godzin

04Identyfikatory

Źródło
MH-3924A (numer katalogowy Cytion 500286)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5799

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Test RAP ujemny metodą PCR dla: Adenovirus FL, Adenovirus K87, Hantavirus, Kilham rat virus, Lmyfocytair choriomeningitis virus, Mycoplasma pulmonis, Pneumonia virus of mice, Rat corona virus / Sialoacryoadenitis virus, Rat parvo virus, Reovirus type 3, Sendai virus, Theiler-s encephalomyelitis virus, Toolan-s H-1 virus.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
2 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 do 5 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Rozpocząć hodowlę przy użyciu całej zawartości kriofiolek w kolbach 2xT25 do hodowli komórkowej. Komórki zregenerują się w ciągu 24 do 48 godzin.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
ACI
Wiek dawcy
16 miesięcy