Siirry sisältöön
MH-3924A
Kudos
Maksa
Sairaus
Maksasolusyöpä
Synonyymit
MH 3924A, MH3924A, MH-3924 A, MH 3924 A, 3924A, Morris hepatoma 3924A, MH-3924, MH3924, MH 3924

Asiakirjat

MH-3924A

Cell line · Tuotenumero 500286

The MH3924A cell line is a well-characterized model derived from Morris rat hepatoma 3924A, which is frequently used in research to study hepatocellular c...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MH3924A-solulinja on hyvin karakterisoitu malli, joka on johdettu Morris-rotan hepatoomasta 3924A, jota käytetään usein tutkimuksissa hepatosellulaarisen karsinooman (HCC) tutkimiseen. Näitä soluja on käytetty laajasti HCC:n kasvun, etäpesäkkeiden ja hoitovasteiden taustalla olevien mekanismien tutkimiseen. MH3924A-solut tunnetaan erityisesti niiden vahvasta proliferatiivisesta kapasiteetista ja kyvystä tunkeutua ympäröiviin kudoksiin, mikä tekee niistä sopivan in vitro- ja in vivo -mallin syövän etenemisen ja mahdollisten hoitojen tutkimiseen.

Tutkimukset ovat osoittaneet, että MH3924A-solujen proliferaatioon ja invasiivisuuteen voidaan vaikuttaa merkittävästi eri tekijöillä. Esimerkiksi hoidon immunosuppressiivisella lääkkeellä takrolimuusilla (FK506) on osoitettu edistävän näiden solujen lisääntymistä, lisäävän niiden invasiivista potentiaalia ja lisäävän metastaasiin osallistuvien keskeisten molekyylien, kuten CXCR4:n ja sen ligandin SDF-1α:n, ilmentymistä. FK506:n vaikutus näihin soluihin korostaa sen potentiaalia pahentaa syövän etenemistä erityisesti elinsiirron jälkeisessä immunosuppressiossa, jossa sen käyttö on yleistä elimen hylkimisen estämiseksi, mutta se voi tahattomasti edistää kasvaimen kasvua.

Lisäksi MH3924A-solut on muunnettu geneettisesti ilmentämään ihmisen natrium/jodidi-symporteria (hNIS), mikä parantaa merkittävästi niiden jodidinottokykyä. Tämä muutos on helpottanut näiden solujen käyttöä radiojodihoitotutkimuksissa, mikä antaa tietoa geeniterapian mahdollisista sovelluksista HCC:n hoidossa. Lisääntyneestä ottokyvystä huolimatta jodidin nopea poistuminen soluista viittaa kuitenkin siihen, että tarvitaan lisämuutoksia tai yhdistelmähoitoja radioaktiivisuuden säilyttämiseksi kasvainsoluissa tehokasta hoitoa varten. MH3924A-solulinja on siten edelleen keskeinen malli sekä perustutkimuksen että soveltavan syöpätutkimuksen kannalta, erityisesti HCC:n molekulaaristen taustatekijöiden ja hoitostrategioiden tutkimisessa.

Kudos
Maksa
Sairaus
Maksasolusyöpä
Synonyymit
  • MH 3924A
  • MH3924A
  • MH-3924 A
  • MH 3924 A
  • 3924A
  • Morris hepatoma 3924A
  • MH-3924
  • MH3924
  • MH 3924

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, ACI-rotissa
Kaksinkertaistumisaika
25-35 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
MH-3924A (Cytionin luettelonumero 500286)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_5799

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
RAP-testi negatiivinen PCR:llä seuraavien osalta: Adenovirus FL, Adenovirus K87, Hantavirus, Kilham-rottavirus, Lmyfocytair-koriomeningiittivirus, Mycoplasma pulmonis, hiirten keuhkokuumevirus, Rotan coronavirus / Sialoacryoadenitisvirus, Rotan parvovirus, Reovirus tyyppi 3, Sendai-virus, Theiler-s encephalomyeliittivirus, Toolan-s H-1-virus.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Aloita viljely käyttäen koko kryopullon sisältöä 2xT25-soluviljelypulloissa. Solut palautuvat 24-48 tunnin kuluessa.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
ACI
Luovuttajan ikä
16 kuukautta