Pāriet uz saturu
MH-3924A
Audums
Aknas
Slimība
Hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
MH 3924A, MH3924A, MH-3924 A, MH 3924 A, 3924A, Morris hepatoma 3924A, MH-3924, MH3924, MH 3924

Dokumenti

MH-3924A

Cell line · Preces numurs 500286

The MH3924A cell line is a well-characterized model derived from Morris rat hepatoma 3924A, which is frequently used in research to study hepatocellular c...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MH3924A šūnu līnija ir labi raksturots modelis, kas iegūts no Morisa žurkas hepatomas 3924A, kuru bieži izmanto pētījumos, lai pētītu hepatocelulāro karcinomu (HCC). Šīs šūnas ir plaši izmantotas, lai pētītu HCC augšanas, metastāžu veidošanās un terapeitiskās atbildes reakcijas mehānismus. MH3924A šūnas īpaši izceļas ar spēcīgu proliferatīvo spēju un spēju iebrukt apkārtējos audos, padarot tās par piemērotu in vitro un in vivo modeli vēža progresēšanas un iespējamās ārstēšanas izpētei.

Pētījumi liecina, ka MH3924A šūnu proliferāciju un invazivitāti var būtiski ietekmēt dažādi faktori. Piemēram, ir pierādīts, ka ārstēšana ar imūnsupresīvo medikamentu takrolīmu (FK506) veicina šo šūnu proliferāciju, palielina to invazīvo potenciālu un palielina galveno metastāzēšanā iesaistīto molekulu, piemēram, CXCR4 un tā liganda SDF-1α, ekspresiju. FK506 iedarbība uz šīm šūnām uzsver tā potenciālu pastiprināt vēža progresēšanu, jo īpaši saistībā ar imunosupresiju pēc transplantācijas, kad to parasti lieto, lai novērstu orgānu atgrūšanu, bet var netīši veicināt audzēju augšanu.

Turklāt MH3924A šūnas ir ģenētiski modificētas, lai ekspresētu cilvēka nātrija/jodīdu simportētāju (hNIS), kas ievērojami uzlabo to jodīdu uzņemšanas spēju. Šī modifikācija ir atvieglojusi šo šūnu izmantošanu radiojoda terapijas pētījumos, sniedzot ieskatu par gēnu terapijas potenciālo pielietojumu HCC ārstēšanā. Tomēr, neraugoties uz paaugstināto uzņemšanas spēju, jodīda straujais izplūdums no šūnām liecina, ka ir nepieciešamas turpmākas modifikācijas vai kombinēta apstrāde, lai radioaktivitāti saglabātu audzēja šūnās efektīvas terapijas nolūkā. Tādējādi MH3924A šūnu līnija joprojām ir galvenais modelis gan fundamentālajos, gan lietišķajos vēža pētījumos, jo īpaši pētot HCC molekulāros pamatus un terapeitiskās stratēģijas.

Audums
Aknas
Slimība
Hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
  • MH 3924A
  • MH3924A
  • MH-3924 A
  • MH 3924 A
  • 3924A
  • Morris hepatoma 3924A
  • MH-3924
  • MH3924
  • MH 3924

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, ACI-rat
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
25 līdz 35 stundas

04Identifikatori

Atsauce
MH-3924A (Cytion kataloga numurs 500286)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_5799

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
RAP tests ar PCR negatīvs: Adenovīruss FL, Adenovīruss K87, Hantavīruss, Kilhema žurku vīruss, Lmyfocytair horiomeningīta vīruss, Mycoplasma pulmonis, peļu pneimonijas vīruss, žurku koronēšanas vīruss / Sialoakrioadenīta vīruss, žurku parvo vīruss, 3. tipa Reovīruss, Sendai vīruss, Theiler-s encefalomielīta vīruss, Toolan-s H-1 vīruss.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 līdz 5 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Uzsāciet kultivēšanu, izmantojot visu kriovietas saturu 2xT25 šūnu kultūru kolbās. Šūnas atjaunosies 24 līdz 48 stundu laikā.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
ACI
Donora vecums
16 mēneši