Mine otse sisu juurde
MH-3924A
Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
MH 3924A, MH3924A, MH-3924 A, MH 3924 A, 3924A, Morris hepatoma 3924A, MH-3924, MH3924, MH 3924

Dokumendid

MH-3924A

Cell line · Toote number 500286

The MH3924A cell line is a well-characterized model derived from Morris rat hepatoma 3924A, which is frequently used in research to study hepatocellular c...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MH3924A rakuliin on hästi iseloomustatud mudel, mis on saadud Morrise roti hepatoomist 3924A, mida kasutatakse sageli teadusuuringutes hepatotsellulaarse kartsinoomi (HCC) uurimiseks. Neid rakke on laialdaselt kasutatud HCC kasvu, metastaaside tekke ja ravivastuste aluseks olevate mehhanismide uurimiseks. MH3924A rakke iseloomustab eelkõige nende tugev proliferatsioonivõime ja võime tungida ümbritsevatesse kudedesse, mis teeb neist sobiva in vitro ja in vivo mudeli vähi progresseerumise ja võimalike ravimeetodite uurimiseks.

Uuringud on näidanud, et MH3924A rakkude proliferatsiooni ja invasiivsust võivad oluliselt mõjutada erinevad tegurid. Näiteks on näidatud, et ravi immunosupressiivse ravimiga takroliimus (FK506) soodustab nende rakkude proliferatsiooni, suurendab nende invasiivset potentsiaali ja suurendab metastaasis osalevate põhimolekulide, nagu CXCR4 ja selle ligand SDF-1α, ekspressiooni. FK506 mõju nendele rakkudele rõhutab selle potentsiaali süvendada vähi progresseerumist, eriti siirdamisjärgse immunosupressiooni kontekstis, kus selle kasutamine on levinud elundi hülgamise vältimiseks, kuid võib tahtmatult soodustada kasvaja kasvu.

Lisaks sellele on MH3924A rakud geneetiliselt muundatud, et ekspresseerida inimese naatrium/jodiid-sümporterit (hNIS), mis suurendab oluliselt nende jodiidi omastamisvõimet. See modifikatsioon on hõlbustanud nende rakkude kasutamist radiojooditeraapia uuringutes, andes ülevaate geeniteraapia võimalikust rakendamisest HCC vastu. Vaatamata suurenenud omastatavusele viitab jodiidi kiire väljavool rakkudest siiski sellele, et radioaktiivsuse säilitamiseks kasvajarakkudes on tõhusa ravi jaoks vaja täiendavaid modifikatsioone või kombineeritud ravi. MH3924A rakuliin on seega jätkuvalt keskne mudel nii vähi alus- kui ka rakendusuuringutes, eelkõige HCC molekulaarsete aluste ja ravistrateegiate uurimisel.

Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
  • MH 3924A
  • MH3924A
  • MH-3924 A
  • MH 3924 A
  • 3924A
  • Morris hepatoma 3924A
  • MH-3924
  • MH3924
  • MH 3924

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, ACI-ratas
Kahekordistumisaeg
25 kuni 35 tundi

04Tunnused

Viide
MH-3924A (Cytioni katalooginumber 500286)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_5799

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
RAP-test on PCR-testiga negatiivne järgmistel juhtudel: Adenoviirus FL, Adenoviirus K87, Hantaviirus, Kilham roti viirus, Lmyfocytair choriomeningitis viirus, Mycoplasma pulmonis, hiirte pneumoonia viirus, Rat corona virus / Sialoacryoadenitis virus, Rat parvo virus, Reovirus tüüp 3, Sendai virus, Theiler-s encephalomyelitis virus, Toolan-s H-1 virus.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Alustage kasvatamist, kasutades kogu krüoviaalide sisu 2xT25 rakukultuurikolbides. Rakud taastuvad 24-48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
ACI
Doonori vanus
16 kuud