Przejdź do treści
SaOS-2
Chusteczka
Kość
Choroba
Mięsak kościopochodny
Synonimy
SAOS-2, Saos-2, SAOS 2, Saos 2, Saos2, SaOs2, SAOS2, Sarcoma OSteogenic-2, SaOS, SAOS

Dokumenty

SaOS-2

Cell line · Numer produktu 300331

Saos-2 cells are an osteosarcoma cell line derived from the primary osteogenic sarcoma of an 11-year-old Caucasian female. These cells are a widely recogn...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki Saos-2 to linia komórek kostniakomięsaka pochodząca z pierwotnego mięsaka osteogennego 11-letniej kobiety rasy kaukaskiej. Komórki te są powszechnie uznanym modelem do badania kostniakomięsaka i biologii kości, ze względu na ich cechy osteoblastyczne i zdolność do wytwarzania macierzy zewnątrzkomórkowej podobnej do kości.

Charakteryzujące się wysokim poziomem aktywności fosfatazy alkalicznej i ekspresją białek specyficznych dla kości, takich jak osteokalcyna i osteopontyna, komórki Saos-2 służą jako skuteczny system in vitro do badania tworzenia kości i patofizjologii kostniakomięsaka. Są one szczególnie cenne do badania odpowiedzi komórkowych na różne bodźce biochemiczne i siły mechaniczne, które naśladują środowisko kości.

Komórki Saos-2 wykazują również aneuploidalny kariotyp, pozbawiony kilku chromosomów, ale z dodatkowymi kopiami innych, typowych dla wielu linii komórek nowotworowych. Są ujemne dla mykoplazmy i posiadają silną zdolność do zwapnienia, dzięki czemu nadają się do testów związanych z odkładaniem minerałów.

W kontekście badań nad rakiem, komórki Saos-2 są szeroko stosowane do badania molekularnych mechanizmów nowotworzenia, przerzutów i wpływu leków przeciwnowotworowych na kostniakomięsaka. Komórki te są również wykorzystywane do badania profili ekspresji genów związanych z różnicowaniem osteoblastycznym i nowotworami złośliwymi.

Ze względu na wysoką zdolność do transfekcji, komórki Saos-2 są podatne na manipulacje genetyczne, co pozwala na badanie funkcji genów i walidację celów molekularnych dla interwencji terapeutycznej. Ta zdolność adaptacyjna ułatwiła znaczne postępy w zrozumieniu genetycznych i molekularnych podstaw raka kości oraz w opracowywaniu ukierunkowanych metod leczenia kostniakomięsaka.

Chusteczka
Kość
Choroba
Mięsak kościopochodny
Synonimy
  • SAOS-2
  • Saos-2
  • SAOS 2
  • Saos 2
  • Saos2
  • SaOs2
  • SAOS2
  • Sarcoma OSteogenic-2
  • SaOS
  • SAOS

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Nie
Stan MSI
Stabilny (MSS)
Karyotyp
Liczba chromosomów macierzystych jest hipotriploidalna z modalną liczbą 56 chromosomów na komórkę i składnikiem 2S występującym na poziomie 13,2%. Ponad dwie trzecie komplementu chromosomowego składało się ze strukturalnie przegrupowanych chromosomów. Większość chromosomów markerowych miała złożone rearanżacje. Pochodzenie segmentów tworzących te markery nie mogło zostać zidentyfikowane. Spośród możliwych do zidentyfikowania markerów, 6p+/q+, 7p+, 11p+ i 12p+ czasami występowały w 2 kopiach na komórkę. Chromosom Y nie został wykryty w preparacie barwionym QM.
Czas podwojenia
35 do 40 godzin

04Identyfikatory

Źródło
SaOS-2 (numer katalogowy Cytion 300331)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0548

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Epidermalny czynnik wzrostu (EGF), transformujący czynnik wzrostu beta (typ 1 i typ 2)
Ekspresja antygenu
Grupa krwi B, Rh+, HLA A2, A3, Bw16, Bw47
Izoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, produkt częstotliwości fenotypu: 0.0002

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Szybko
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
11 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski