Mine otse sisu juurde
SaOS-2
Kude
Bone
Haigus
Osteosarkoom
Sünonüümid
SAOS-2, Saos-2, SAOS 2, Saos 2, Saos2, SaOs2, SAOS2, Sarcoma OSteogenic-2, SaOS, SAOS

Dokumendid

SaOS-2

Cell line · Toote number 300331

Saos-2 cells are an osteosarcoma cell line derived from the primary osteogenic sarcoma of an 11-year-old Caucasian female. These cells are a widely recogn...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Saos-2 rakud on osteosarkoomi rakuliin, mis on saadud 11-aastase kaukaasia naise primaarsest osteogeensest sarkoomist. Need rakud on laialdaselt tunnustatud mudel osteosarkoomi ja luubioloogia uurimiseks, kuna neil on osteoblastilised omadused ja võime toota luulaadset ekstratsellulaarset maatriksit.

Saos-2 rakke iseloomustab nende kõrge leeliseline fosfataasi aktiivsus ja luuspetsiifiliste valkude, nagu osteokaltsiin ja osteopontin, ekspressioon, mistõttu on need rakud tõhus in vitro süsteem luu moodustumise ja osteosarkoomi patofüsioloogia uurimiseks. Need on eriti väärtuslikud rakkude vastuste uurimiseks erinevatele biokeemilistele stiimulitele ja mehaanilistele jõududele, mis jäljendavad luukeskkonda.

Saos-2 rakkudel on ka aneuploidne karüotüüp, millel puuduvad mitmed kromosoomid, kuid on teiste kromosoomide lisakoopiad, mis on tüüpiline paljudele vähirakuliinidele. Nad on mükoplasma suhtes negatiivsed ja neil on tugev kaltsifikatsioonivõime, mistõttu sobivad nad mineraalide ladestumisega seotud analüüside jaoks.

Vähiuuringute kontekstis kasutatakse Saos-2 rakke laialdaselt kasvajate tekke ja metastaaside molekulaarsete mehhanismide ning vähivastaste ravimite mõju uurimiseks osteosarkoomile. Samuti kasutatakse rakke osteoblastilise diferentseerumise ja pahaloomulisusega seotud geeniekspressiooniprofiilide uurimiseks.

Saos-2 rakud on tänu oma suurele transfeektsioonivõimele hästi kasutatavad geneetiliseks manipulatsiooniks, mis võimaldab uurida geenide funktsiooni ja valideerida molekulaarseid sihtmärke terapeutiliseks sekkumiseks. Selline kohandatavus on aidanud oluliselt kaasa luuvähi geneetiliste ja molekulaarsete aluste mõistmisele ning osteosarkoomi sihtotstarbelise ravi väljatöötamisele.

Kude
Bone
Haigus
Osteosarkoom
Sünonüümid
  • SAOS-2
  • Saos-2
  • SAOS 2
  • Saos 2
  • Saos2
  • SaOs2
  • SAOS2
  • Sarcoma OSteogenic-2
  • SaOS
  • SAOS

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Ei
MSI staatus
Stabiilne (MSS)
Karyotüüp
Tüveline kromosoomide arv on hüpotriploidne, modaalne arv 56 kromosoomi raku kohta ja 2S-komponent esineb 13,2% ulatuses. Üle kahe kolmandiku kromosoomikomplektist moodustasid struktuurselt ümber paigutatud kromosoomid. Enamikul markerkromosoomidest olid keerulised ümberkorraldused. Nende markerite moodustavate segmentide päritolu ei olnud võimalik kindlaks teha. Identifitseeritavatest markeritest esinesid 6p+/q+, 7p+, 11p+ ja 12p+ aeg-ajalt 2 koopiat raku kohta. Y-kromosoomi ei tuvastatud QM-värvitud preparaadis.
Kahekordistumisaeg
35-40 tundi

04Tunnused

Viide
SaOS-2 (Cytioni katalooginumber 300331)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0548

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Epidermise kasvufaktor (EGF), transformeeriv kasvufaktor beeta (tüüp 1 ja tüüp 2)
Antigeeni ekspressioon
Veregrupp B, Rh+, HLA A2, A3, Bw16, Bw47
Isoensüümid
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0002

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Kiire
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
11 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia