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SaOS-2
Tecido
Osso
Doença
Osteossarcoma
Sinónimos
SAOS-2, Saos-2, SAOS 2, Saos 2, Saos2, SaOs2, SAOS2, Sarcoma OSteogenic-2, SaOS, SAOS

Documentos

SaOS-2

Cell line · Número do produto 300331

Saos-2 cells are an osteosarcoma cell line derived from the primary osteogenic sarcoma of an 11-year-old Caucasian female. These cells are a widely recogn...

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01Informações gerais

Descrição

As células Saos-2 são uma linha celular de osteossarcoma derivada do sarcoma osteogénico primário de uma mulher caucasiana de 11 anos. Estas células são um modelo amplamente reconhecido para o estudo do osteossarcoma e da biologia óssea, devido às suas caraterísticas osteoblásticas e à capacidade de produzir uma matriz extracelular semelhante à do osso.

Caracterizadas pelo seu elevado nível de atividade de fosfatase alcalina e pela expressão de proteínas específicas do osso, como a osteocalcina e a osteopontina, as células Saos-2 constituem um sistema in vitro eficaz para estudar a formação óssea e a fisiopatologia do osteossarcoma. São particularmente valiosas para investigar as respostas celulares a vários estímulos bioquímicos e forças mecânicas que imitam o ambiente ósseo.

As células Saos-2 também apresentam um cariótipo aneuploide, com falta de vários cromossomas mas com cópias extra de outros, típico de muitas linhas celulares cancerígenas. São negativas para micoplasma e possuem uma capacidade robusta de calcificação, o que as torna adequadas para ensaios relacionados com a deposição de minerais.

No contexto da investigação sobre o cancro, as células Saos-2 são amplamente utilizadas para explorar os mecanismos moleculares da tumorigénese, das metástases e dos efeitos dos medicamentos anticancerígenos no osteossarcoma. As células são também utilizadas para estudar perfis de expressão de genes associados à diferenciação osteoblástica e à malignidade.

Devido à sua elevada transfectabilidade, as células Saos-2 são passíveis de manipulação genética, o que permite o estudo da função dos genes e a validação de alvos moleculares para intervenção terapêutica. Esta adaptabilidade facilitou avanços significativos na compreensão da base genética e molecular do cancro ósseo e no desenvolvimento de tratamentos específicos para o osteossarcoma.

Tecido
Osso
Doença
Osteossarcoma
Sinónimos
  • SAOS-2
  • Saos-2
  • SAOS 2
  • Saos 2
  • Saos2
  • SaOs2
  • SAOS2
  • Sarcoma OSteogenic-2
  • SaOS
  • SAOS

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Não
Estado do MSI
Estável (MSS)
Cariótipo
O número de cromossomas da linha-tronco é hipotriplóide, com o número modal de 56 cromossomas por célula e o componente 2S a ocorrer em 13,2%. Mais de dois terços do complemento cromossómico consistem em cromossomas estruturalmente rearranjados. A maioria dos cromossomas marcadores apresentava rearranjos complexos. A origem dos segmentos que compõem estes marcadores não pôde ser identificada. Dos marcadores identificáveis, 6p+/q+, 7p+, 11p+ e 12p+ estavam ocasionalmente presentes em 2 cópias por célula. O cromossoma Y não foi detectado na preparação corada com QM.
Tempo de duplicação
35 a 40 horas

04Identificadores

Referência
SaOS-2 (número de catálogo Cytion 300331)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0548

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Fator de crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimento transformador beta (tipo 1 e tipo 2)
Expressão do antígeno
Tipo de sangue B, Rh+, HLA A2, A3, Bw16, Bw47
Isoenzimas
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Produto de frequência fenotípica: 0.0002

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Rápido
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
11 anos
Etnia
Caucasiano