Siirry sisältöön
SaOS-2
Kudos
Luu
Sairaus
Osteosarkooma
Synonyymit
SAOS-2, Saos-2, SAOS 2, Saos 2, Saos2, SaOs2, SAOS2, Sarcoma OSteogenic-2, SaOS, SAOS

Asiakirjat

SaOS-2

Cell line · Tuotenumero 300331

Saos-2 cells are an osteosarcoma cell line derived from the primary osteogenic sarcoma of an 11-year-old Caucasian female. These cells are a widely recogn...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Saos-2-solut ovat osteosarkoomasolulinja, joka on peräisin 11-vuotiaan valkoihoisen naisen primaarisesta osteogeenisestä sarkoomasta. Nämä solut ovat laajalti tunnustettu malli osteosarkooman ja luubiologian tutkimiseen, koska ne ovat osteoblastisia ja kykenevät tuottamaan luun kaltaista solunulkoista matriisia.

Saos-2-soluille on ominaista niiden korkea alkalinen fosfataasiaktiivisuus ja luustospesifisten proteiinien, kuten osteokalsiinin ja osteopontinin, ilmentyminen, ja ne toimivat tehokkaana in vitro -järjestelmänä luunmuodostuksen ja osteosarkooman patofysiologian tutkimiseen. Ne ovat erityisen arvokkaita tutkittaessa solujen vasteita erilaisiin biokemiallisiin ärsykkeisiin ja mekaanisiin voimiin, jotka jäljittelevät luun ympäristöä.

Saos-2-soluilla on myös monille syöpäsolulinjoille tyypillinen aneuploidinen karyotyyppi, josta puuttuu useita kromosomeja mutta jossa on ylimääräisiä kopioita toisista. Ne ovat mykoplasman suhteen negatiivisia ja niillä on vahva kyky kalkkiutumiseen, joten ne soveltuvat mineraalien kertymiseen liittyviin määrityksiin.

Syöpätutkimuksen yhteydessä Saos-2-soluja käytetään laajalti kasvainten syntymekanismien, etäpesäkkeiden ja syöpälääkkeiden vaikutusten tutkimiseen osteosarkoomassa. Soluja käytetään myös osteoblastiseen erilaistumiseen ja pahanlaatuisuuteen liittyvien geeniekspressioprofiilien tutkimiseen.

Koska Saos-2-solut ovat hyvin siirrettävissä, niitä voidaan geneettisesti manipuloida, mikä mahdollistaa geenien toiminnan tutkimisen ja molekyylikohteiden validoinnin terapeuttisia toimenpiteitä varten. Tämä muunneltavuus on edistänyt merkittävästi luusyövän geneettisen ja molekulaarisen perustan ymmärtämistä ja osteosarkooman kohdennettujen hoitojen kehittämistä.

Kudos
Luu
Sairaus
Osteosarkooma
Synonyymit
  • SAOS-2
  • Saos-2
  • SAOS 2
  • Saos 2
  • Saos2
  • SaOs2
  • SAOS2
  • Sarcoma OSteogenic-2
  • SaOS
  • SAOS

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Ei
MSI-tila
Vakaa (MSS)
Karyotyyppi
Kromosomiluku on hypotriploidinen, modaalinen kromosomiluku on 56 kromosomia solua kohti ja 2S-komponenttia on 13,2 prosenttia. Yli kaksi kolmasosaa kromosomikomplementista koostui rakenteellisesti uudelleen järjestäytyneistä kromosomeista. Useimmilla merkkikromosomeilla oli monimutkaisia uudelleenjärjestelyjä. Näiden markkerikromosomien muodostavien segmenttien alkuperää ei voitu tunnistaa. Tunnistettavista markkereista 6p+/q+, 7p+, 11p+ ja 12p+ esiintyi toisinaan 2 kopiota solua kohti. Y-kromosomia ei havaittu QM-värjätyssä valmisteessa.
Kaksinkertaistumisaika
35-40 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
SaOS-2 (Cytionin luettelonumero 300331)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0548

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Epiderminen kasvutekijä (EGF), transformoiva kasvutekijä beeta (tyyppi 1 ja tyyppi 2)
Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä B, Rh+, HLA A2, A3, Bw16, Bw47, Bw47
Isoentsyymit
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0002

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Nopea
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
11 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen