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SK-N-DZ
Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
SKNDZ

Documentos

SK-N-DZ

Cell line · Número do produto 305628

A linha celular SK-N-DZ é um modelo de neuroblastoma humano estabelecido a partir da medula óssea metastática de uma criança com neuroblastoma. Faz parte da série SK-N...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular SK-N-DZ é um modelo de neuroblastoma humano estabelecido a partir da medula óssea metastática de uma criança com neuroblastoma. Faz parte da série SK-N de linhas celulares de neuroblastoma e apresenta características de células tumorais derivadas da crista neural. Estas células são aderentes em cultura e apresentam uma pequena fração de células da população lateral (SP), o que indica a existência de uma subpopulação semelhante às células estaminais cancerígenas com elevada capacidade de efluxo de fármacos.

As células SK-N-DZ têm sido amplamente utilizadas na investigação para compreender o papel das alterações genéticas e epigenéticas no neuroblastoma. Demonstrou-se que a linha celular apresenta amplificação do gene MYCN e mutações no gene ALK, ambas implicadas no fenótipo agressivo e no mau prognóstico dos neuroblastomas de alto risco. Além disso, a SK-N-DZ tem sido utilizada para avaliar respostas terapêuticas a agentes como os retinóides e os derivados da vitamina E. Estudos demonstraram que a SK-N-DZ é excepcionalmente sensível ao ácido 13-cis-retinóico, apresentando lise celular significativa em baixas concentrações, ao contrário de outras linhas celulares de neuroblastoma.

A SK-N-DZ tem sido utilizada em experiências que exploram a diferenciação e a capacidade estaminal do neuroblastoma. A capacidade da linha celular de formar extensões de neuritos sob determinadas condições de tratamento destaca o seu potencial para investigar a diferenciação tumoral e a plasticidade celular. Estas características, combinadas com o seu background genético bem caracterizado, tornam a SK-N-DZ um modelo valioso para o avanço de estratégias terapêuticas e para a compreensão dos fundamentos moleculares do neuroblastoma.

Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Local da metástase
Medula óssea
Aplicações
Estudos sobre tumores. Estudos sobre a resistência da MRD-1. Extremamente sensível ao ácido cis-retinóico; cultura celular 3D, imunologia, neurociência
Sinónimos
  • SKNDZ

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tipo de célula
Neuronal

04Identificadores

Referência
SK-N-DZ (número de catálogo da Cytion 305628)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1701

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: TP53, simples, p.Arg110Leu (c.329G>T), homozigótica

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Densidade de sementeira
0,3 × 10⁶ células/ml
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
2 anos
Etnia
Caucasianos e nativos da América do Norte