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U87MG-Luc
Tecido
Cérebro
Doença
Glioblastoma
Local da metástase
Localização do tumor primário (cérebro)
Sinónimos
U-87MG, U87 MG, U-87-MG, U87-MG, U-87 MG, U-87, U87, 87 MG, 87MG

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U87MG-Luc

Cell line · Número do produto 305707

As células U-87 MG-Luc são um derivado bioluminescente da linha celular humana de glioblastoma U-87 MG, que foram geneticamente modificadas para expressarem de forma estável a fi...

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01Informações gerais

Descrição

As células U-87 MG-Luc são um derivado bioluminescente da linha celular humana de glioblastoma U-87 MG, que foram geneticamente modificadas para expressarem de forma estável o gene repórter da luciferase de pirilampo. Quando expostas ao substrato luciferina, estas células geram um sinal luminescente proporcional ao número de células viáveis, permitindo uma monitorização sensível e quantitativa do crescimento tumoral, da proliferação e da resposta terapêutica. As células U-87 MG-Luc mantêm muitas das propriedades morfológicas e biológicas do modelo parental de glioblastoma, incluindo crescimento aderente, proliferação rápida e expressão de marcadores comumente associados a células tumorais astrocíticas.

O sistema repórter de luciferase torna as células U-87 MG-Luc particularmente valiosas para estudos de xenoenxertos ortotópicos e subcutâneos em modelos animais imunocomprometidos. A imagiologia por bioluminescência permite a avaliação longitudinal não invasiva do estabelecimento, invasão e recorrência de tumores intracranianos, bem como da resposta a terapias experimentais, reduzindo a necessidade de procedimentos invasivos ou de grandes coortes de animais. Estas células são amplamente utilizadas na investigação pré-clínica em neuro-oncologia para avaliar quimioterapêuticos, inibidores direcionados, imunoterapias, resposta à radiação, sistemas de administração de fármacos baseados em nanopartículas e abordagens de terapia genética. In vitro, as células U-87 MG-Luc também são adequadas para ensaios de viabilidade de alto rendimento, estudos de migração e invasão e análise em tempo real da dinâmica das células de glioblastoma.

Tal como a linha parental U-87 MG, as células U-87 MG-Luc exibem características associadas à biologia do glioma de alto grau, incluindo vias de sinalização alteradas envolvidas na proliferação, resistência à apoptose, angiogénese e adaptação metabólica. Os investigadores devem ter em conta que diferentes repositórios e laboratórios podem utilizar variantes expressoras de luciferase geradas de forma independente, com diferenças nos locais de integração do vetor, nos sistemas promotores, na intensidade do repórter e nos marcadores de seleção. Recomenda-se, portanto, a autenticação e validação da estabilidade da luciferase, do comportamento de crescimento e das características moleculares antes da utilização experimental, particularmente em estudos que envolvam imagiologia in vivo a longo prazo ou triagem terapêutica.

Tecido
Cérebro
Doença
Glioblastoma
Local da metástase
Localização do tumor primário (cérebro)
Aplicações
Investigação sobre o glioblastoma; imagiologia por bioluminescência em modelos de xenoenxertos ortotópicos e subcutâneos; monitorização de tumores intracranianos; avaliação da administração de fármacos; terapia com nanopartículas; resposta à radiação; avaliação da imunoterapia; estudos pré-clínicos em neuro-oncologia
Sinónimos
  • U-87MG
  • U87 MG
  • U-87-MG
  • U87-MG
  • U-87 MG
  • U-87
  • U87
  • 87 MG
  • 87MG

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células gliais (astrocíticas)
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus inoculados por via subcutânea com 107 células

04Identificadores

Referência
U87MG-Luc (número de catálogo da Cytion 305707)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Luc2 (firefly, com codões otimizados)
Isoenzimas
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
44 anos
Etnia
Caucasiano