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NCI-H2126
Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma de células grandes
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
H-2126, NCIH2126, NCI-H2126

Documentos

NCI-H2126

Cell line · Número do produto 300639

The NCI-H2126 cell line is derived from a human large cell carcinoma, a subtype of non-small cell lung cancer (NSCLC). Originating from the lung tissue of...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular NCI-H2126 é derivada de um carcinoma humano de células grandes, um subtipo de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC). Com origem no tecido pulmonar de um doente do sexo masculino, esta linha celular apresenta caraterísticas típicas dos carcinomas de células grandes, incluindo caraterísticas celulares pouco diferenciadas e indiferenciadas. Trata-se de um modelo importante para compreender os mecanismos genéticos e moleculares subjacentes aos cancros do pulmão de grandes células e para testar agentes terapêuticos destinados a este subtipo de NSCLC.

Os estudos genómicos do NCI-H2126 identificaram perdas alélicas frequentes e aberrações cromossómicas, tais como deleções nos braços cromossómicos 6q e 13q, que estão normalmente implicadas na inativação de genes supressores de tumores no CPNPC. Estas alterações genéticas contribuem para a perturbação de vias reguladoras fundamentais, incluindo as envolvidas no controlo do ciclo celular e na apoptose. A linha celular tem sido utilizada em estudos comparativos para distinguir padrões de perda cromossómica em diferentes subtipos de cancro do pulmão, melhorando a compreensão das assinaturas moleculares específicas do NSCLC.

A linha celular NCI-H2126 foi também incluída em extensos programas de rastreio de medicamentos para avaliar a sua sensibilidade e resistência a vários agentes quimioterapêuticos e terapias direcionadas. O perfil genético da linha celular e o seu potencial tumorigénico em modelos de xenoenxerto fazem dela um recurso valioso para estudos pré-clínicos centrados no desenvolvimento e aperfeiçoamento de tratamentos para o carcinoma de células grandes e outras formas de NSCLC.

Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma de células grandes
Local da metástase
Derrame pleural
Aplicações
cultura de células 3D, Investigação do cancro
Sinónimos
  • H-2126
  • NCIH2126
  • NCI-H2126

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus
Estado de ploidia
Hipertriplóide

04Identificadores

Referência
NCI-H2126 (número de catálogo Cytion 300639)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1532

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
AK-1, 1, ES-D, 1-2, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1-2, PGM3, 2
Vírus
EBV (Transformante)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 5% de FBS, 0,005 mg/mL de insulina, 0,01 mg/mL de transferrina, 30nM de selenito de sódio, 10 nM de hidrocortisona, 10 nM de beta-estradiol
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
65 anos
Etnia
Europeu