DAKIKI

DAKIKI, yüzeyde IgA1 eksprese eden ve polimerik IgA1 salgılayan, insan Epstein-Barr virüsü (EBV) pozitif bir B-lenfoblastoid hücre hattıdır. İlk olarak nazofarenks karsinomu olan bir yetişkin hastanın periferik lenfositlerinden elde edilmiş ve daha sonra sürekli çoğalan bir süspansiyon kültürü olarak kurulmuştur. Hücreler tipik lenfoblastoid morfolojisi sergiler ve serum ilaveli RPMI bazlı besiyerlerinde büyür. DAKIKI, insan IgA1 üreten B hücrelerinin bir modeli olarak, özellikle immünoglobulin sentezi, salgı düzenlemesi ve translasyon sonrası glikozilasyonu araştıran çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır.

Biyokimyasal ve lektin bazlı analizler, DAKIKI hücreleri tarafından salgılanan IgA1'in menteşe bölgesinde galaktoz eksikliği olan O-bağlı glikanlar sergilediğini göstermiştir. Monosakkarit bileşim analizi ve lektin ELISA, IgA nefropatisinde gözlenen anormal glikozile IgA1'in karakteristik bir glikoformu olan terminal veya α2,6-sialile N-asetilgalaktozamin (GalNAc) kalıntılarının zenginleşmesini doğrulamaktadır. Nöraminidaz tedavisi, Helix aspersa aglütinin reaktivitesini belirgin şekilde artırmaktadır; bu da sialile GalNAc yapılarının varlığını göstermektedir. DAKIKI hücrelerinden elde edilen Golgi fraksiyonlarını kullanan fonksiyonel testler, CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1 α2,6-sialiltransferaz aktivitesini ortaya koymakta ve bu hücrelerin Gal eksikliği olan O-glikozanları doğrudan sialile etme kapasitesini doğrulamaktadır. Transkripsiyon analizleri, ST6-GalNAcI'nin değil, ST6-GalNAcII'nin ekspresyonunu ortaya koymaktadır; bu da, IgA1'deki menteşe bölgesi GalNAc'ın α2,6 sialilasyonunda ST6-GalNAcII'nin aracılık rolünü desteklemektedir.

Glikosilasyon araştırmalarındaki yararına ek olarak, DAKIKI, belirli insan B hücre hatlarında immünoglobulin salgılanmasını modüle edebilen B hücresi indükleyici faktörlere ve forbol esterlerine yanıt verme açısından değerlendirilmiştir. DAKIKI, yapısal olarak IgA salgılarken, immünoglobulin üretiminin düzenlenmesi ve farklılaşma durumlarını incelemek için kullanılan EBV ile dönüştürülmüş B hücresi modelleri arasına dahil edilmiştir. DAKIKI, stabil IgA1 salgılama profili ve galaktoz eksikliği olan, α2,6-sialile edilmiş menteşe bölgesi glikanlarının tekrarlanabilir üretimi sayesinde, IgA1 glikozilasyon mekanizmalarını, B hücresi farklılaşmasını ve IgA ile ilişkili bozuklukların moleküler patogenezini araştırmak için iyi karakterize edilmiş bir in vitro sistem sunmaktadır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın