DAKIKI

DAKIKI هو خط خلوي ليمفوبلاستويدي من نوع B إيجابي لفيروس إبشتاين-بار (EBV) لدى الإنسان، يعبر عن IgA1 السطحي ويُفرز IgA1 البوليمري. وقد تم استخلاصه في الأصل من الخلايا الليمفاوية الطرفية لمريض بالغ مصاب بسرطان البلعوم الأنفي، ثم تم تأسيسه لاحقًا كمزرعة معلقة تتكاثر باستمرار. تُظهر الخلايا الشكل النمطي للخلايا اللمفاوية البلاستويدية وتنمو في وسط RPMI المُضاف إليه مصل. وقد استُخدمت DAKIKI على نطاق واسع كنموذج للخلايا البائية المنتجة لـ IgA1 البشري، لا سيما في الدراسات التي تبحث في تخليق الغلوبولين المناعي، وتنظيم الإفراز، والغليكوزيلاتيون ما بعد الترجمة.

أظهرت التحليلات الكيميائية الحيوية والتحليلات القائمة على الليكتين أن IgA1 الذي تفرزه خلايا DAKIKI يحتوي على جليكانات مرتبطة بـ O ناقصة الجالاكتوز داخل منطقة المفصلة. يؤكد تحليل تكوين السكريات الأحادية واختبار ELISA للليكتين وجود بقايا N-أسيتيلجالاكتوزامين (GalNAc) طرفية أو مزودة بـα2,6-سياليل، وهي شكل جليكوزي مميز لـIgA1 الذي يعاني من جليكوزيلاتيون شاذ والذي يُلاحظ في اعتلال الكلية الناتج عن IgA. يزيد العلاج بالنيورامينيداز بشكل ملحوظ من تفاعل مادة Helix aspersa agglutinin، مما يشير إلى وجود هياكل GalNAc المسللة. تثبت الاختبارات الوظيفية التي تستخدم أجزاء غنية بجولجي من خلايا DAKIKI نشاط CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1 α2,6-sialyltransferase، مما يؤكد قدرة هذه الخلايا على إجراء عملية السيلية مباشرةً للغليكانات O-التي تعاني من نقص الجالاكتوز. تكشف التحليلات النسخية عن التعبير عن ST6-GalNAcII وليس ST6-GalNAcI، مما يدعم دور ST6-GalNAcII في التوسط في سياليلاتيون α2,6 لـ GalNAc في منطقة المفصلة في IgA1.

بالإضافة إلى فائدته في أبحاث الجليكوزيلاتيون، تم تقييم DAKIKI من حيث استجابته لعوامل تحفيز الخلايا البائية وإسترات الفوربول، التي يمكنها تعديل إفراز الغلوبولين المناعي في بعض سلالات الخلايا البائية البشرية. وبينما يفرز DAKIKI IgA بشكل دائم، فقد تم إدراجه ضمن نماذج الخلايا البائية المحولة بفيروس EBV المستخدمة لدراسة تنظيم إنتاج الغلوبولين المناعي وحالات التمايز. نظرًا لملف إفراز IgA1 المستقر وإنتاجه القابل للتكرار لـ glycans في منطقة المفصلة التي تفتقر إلى الجالاكتوز وα2,6-sialylated، يمثل DAKIKI نظامًا مختبريًا موصوفًا جيدًا لدراسة آليات جليكوزيلاتيون IgA1، وتمايز الخلايا البائية، والتسبب الجزيئي للاضطرابات المرتبطة بـ IgA.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان