İçeriğe atla
INS-1
Doku
Pankreas, Langerhans adacıkları
Hastalık
Sıçan insülinoma
Eş anlamlılar
INS1

INS-1

Cell line · Ürün numarası 300471

The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stok az
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

INS-1 hücre hattı, sıçanlarda x-ışını ile oluşturulan nakledilebilir bir insülinomadan türetilmiştir. INS-1 hücreleri yüksek konsantrasyonda insülin içerdiğinden ve glukoz seviyelerindeki değişikliklere yanıt verdiğinden, beta hücrelerinin işlevini incelemek için sıklıkla kullanılırlar. Büyüme ve hormon ifadesi indirgeyici ajan 2-mercaptoethanol'e bağlıdır.

INS-1 hücreleri, olgun insülin pozitif hücrelerden ve insülin ve glukagon proteinlerini ifade eden olgunlaşmamış bi-hormonal hücrelerden oluşan heterojenlikleriyle dikkat çekmektedir.

Bi-hormonal INS-1 hücreleri daha düşük Nkx6.1 ifadesine sahiptir ve alfa hücre belirteçlerinden yoksundur, bu da tam olarak olgunlaşmadıklarını gösterir. Ayrıca, kronik glikoz uyarımı INS-1 hücrelerinde insülin gen ve protein ifadesini azaltır. Bu nedenle, GLP-1, GLP-2 ve glukagon seviyeleri gibi insülin ve proglukagon türevi peptitler azalır.

Doku
Pankreas, Langerhans adacıkları
Hastalık
Sıçan insülinoma
Eş anlamlılar
  • INS1

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
Beta hücresi

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
INS-1 (Cytion katalog numarası 300471)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_0352

05İfade ve duyarlılık

Ürünler
İnsülin, glutatyon

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 ısıyla inaktive edilmiş FBS ile destekleyin, 2,5 g/L glukoz ve 10 mM HEPES ekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücrelerini 15 ml'lik bir tüpte toplayın ve yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile nazikçe yıkayın (T25 şişeleri için 3-5 ml ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın). Accutase uygulayın (T25 şişeler için 1-2 ml, T75 şişeler için 2,5 ml) ve hücre tabakasının tamamen kaplandığından emin olun. Hücreleri 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakın. İnkübasyonun ardından, hem süspansiyonu hem de yapışık hücreleri birleştirin ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunu taze ortam içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
NEDH
Bağışçının yaşı
666 gün