Gå direkt till innehållet
INS-1
Vävnad
Bukspottkörteln, Langerhanska öar
Sjukdom
Insulinom från råtta
Synonymer
INS1

INS-1

Cell line · Produktnummer 300471

The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...

€550.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Lågt lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

INS-1-cellinjen härrör från ett röntgenframkallat transplanterbart insulinom hos råttor. Eftersom INS-1-cellerna innehåller en hög koncentration av insulin och reagerar på förändringar i glukosnivån används de ofta för att studera betacellernas funktion. Tillväxt och hormonuttryck är beroende av reduktionsmedlet 2-merkaptoetanol.

INS-1-cellerna utmärker sig genom sin heterogenitet och består av mogna insulinpositiva celler och omogna bi-hormonella celler som uttrycker insulin- och glukagonproteiner.

Bi-hormonella INS-1-celler har lägre Nkx6.1-uttryck och saknar alfacellsmarkörer, vilket tyder på att de inte är fullt mogna. Dessutom minskar kronisk glukosstimulering uttrycket av insulingener och insulinproteiner i INS-1-celler. Därmed minskar nivåerna av insulin och proglukagonderiverade peptider som GLP-1, GLP-2 och glukagon.

Vävnad
Bukspottkörteln, Langerhanska öar
Sjukdom
Insulinom från råtta
Synonymer
  • INS1

02Klassificering

Organism
Råtta
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celltyp
Betacell

04Identifierare

Källa
INS-1 (Cytion katalognummer 300471)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0352

05Uttryck och mottaglighet

Produkter
Insulin, glutation

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera med 10% värmeinaktiverad FBS, tillsätt 2,5 g/L glukos och 10 mM HEPES
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Samla de suspenderade cellerna i ett 15 ml rör och tvätta försiktigt de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (använd 3-5 ml för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar). Applicera Accutase (1-2 ml för T25-kolvar, 2,5 ml för T75-kolvar) och se till att cellskiktet täcks helt. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 10 minuter. Efter inkubationen, kombinera och centrifugera både suspensionen och de vidhäftande cellerna. Efter centrifugering, resuspendera försiktigt cellpelleten och överför cellsuspensionen till nya kolvar med nytt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
NEDH
Donatorns ålder
666 dagar