INS-1
Cell line · Varenummer 300471
The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...
Tilpasning / Anbefalinger
- INS-1Cell line€550.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
INS-1-cellelinjen stammer fra et røntgenskabt, transplanterbart insulinom hos rotter. Fordi INS-1-celler indeholder en høj koncentration af insulin og reagerer på ændringer i glukoseniveauet, bruges de ofte til at studere betacellernes funktion. Vækst og hormonudtryk er afhængige af reduktionsmidlet 2-mercaptoethanol.
INS-1-celler er bemærkelsesværdige for deres heterogenitet, der består af modne insulinpositive celler og umodne bi-hormonelle celler, der udtrykker insulin- og glukagonproteiner.
Bi-hormonelle INS-1-celler har lavere Nkx6.1-ekspression og mangler alfacellemarkører, hvilket indikerer, at de ikke er fuldt modne. Desuden reducerer kronisk glukosestimulering udtrykket af insulingener og -proteiner i INS-1-celler. Dermed reduceres niveauet af insulin og proglukagon-afledte peptider som GLP-1, GLP-2 og glukagon.
- Væv
- Bugspytkirtel, Langerhanske øer
- Sygdom
- Rotteinsulinom
- Synonymer
- INS1
02Klassificering
- Organisme
- Rotte
- Køn
- Mand
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Celletype
- Betacelle
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- INS-1 (Cytion katalognummer 300471)
- NCBI-skattenummer
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0352
05Udtryk og modtagelighed
- Produkter
- Insulin, glutathion
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Supplér mediet med 10 % varmeinaktiveret FBS, tilsæt 2,5 g/L glukose og 10 mM HEPES
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Saml de suspenderede celler i et 15 ml rør, og vask forsigtigt de klæbende celler med PBS uden calcium og magnesium (brug 3-5 ml til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml til T25-kolber, 2,5 ml til T75-kolber) for at sikre fuld dækning af cellelaget. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 10 minutter. Efter inkubationen kombineres og centrifugeres både suspensionen og de vedhæftede celler. Efter centrifugering resuspenderes cellepelleten forsigtigt, og cellesuspensionen overføres til nye kolber, der indeholder frisk medium.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Race / underart
- NEDH
- Donorens alder
- 666 dage
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja