Μετάβαση στο περιεχόμενο
INS-1
Ιστός
Πάγκρεας, νησίδια του Langerhans
Ασθένεια
Ινσουλινώμα αρουραίου
Συνώνυμα
INS1

Έγγραφα

INS-1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300471

The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Χαμηλά αποθέματα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά INS-1 προέρχεται από μεταμοσχεύσιμο ινσουλινώμα που δημιουργήθηκε με ακτίνες Χ σε αρουραίους. Επειδή τα κύτταρα INS-1 περιέχουν υψηλή συγκέντρωση ινσουλίνης και ανταποκρίνονται στις μεταβολές των επιπέδων γλυκόζης, χρησιμοποιούνται συχνά για τη μελέτη της λειτουργίας των β-κυττάρων. Η ανάπτυξη και η έκφραση της ορμόνης εξαρτώνται από τον αναγωγικό παράγοντα 2-μερκαπτοαιθανόλη.

Τα κύτταρα INS-1 είναι αξιοσημείωτα για την ετερογένειά τους, αποτελούμενα από ώριμα ινσουλινοθετικά κύτταρα και ανώριμα δι-ορμονικά κύτταρα που εκφράζουν πρωτεΐνες ινσουλίνης και γλυκαγόνης.

Τα δι-ορμονικά κύτταρα INS-1 έχουν χαμηλότερη έκφραση του Nkx6.1 και δεν διαθέτουν δείκτες άλφα κυττάρων, γεγονός που υποδηλώνει ότι δεν έχουν ωριμάσει πλήρως. Επιπλέον, η χρόνια διέγερση με γλυκόζη μειώνει την έκφραση γονιδίων και πρωτεϊνών ινσουλίνης στα κύτταρα INS-1. Ως εκ τούτου, τα επίπεδα της ινσουλίνης και των πεπτιδίων που προέρχονται από την προγλυκαγόνη, όπως το GLP-1, το GLP-2 και η γλυκαγόνη, είναι μειωμένα.

Ιστός
Πάγκρεας, νησίδια του Langerhans
Ασθένεια
Ινσουλινώμα αρουραίου
Συνώνυμα
  • INS1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Αρουραίος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Τύπος κυττάρου
Βήτα κύτταρο

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
INS-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 300471)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10116
Κελλοσαύρος
CVCL_0352

05Έκφραση και ευαισθησία

Προϊόντα
Ινσουλίνη, γλουταθειόνη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS που έχει απενεργοποιηθεί με θερμότητα, προσθέστε 2,5 g/L γλυκόζης και 10 mM HEPES
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Συγκεντρώστε τα εναιωρήματα σε ένα σωληνάριο των 15 ml και πλύνετε απαλά τα προσκολλημένα κύτταρα με PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο (χρησιμοποιήστε 3-5 ml για φιάλες T25 και 5-10 ml για φιάλες T75). Εφαρμόστε Accutase (1-2 ml για φιάλες T25, 2,5 ml για φιάλες T75) εξασφαλίζοντας πλήρη κάλυψη της κυτταρικής στιβάδας. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 10 λεπτά. Μετά την επώαση, συνδυάστε και φυγοκεντρίστε τόσο το εναιώρημα όσο και τα προσκολλημένα κύτταρα. Μετά τη φυγοκέντρηση, ανασυγκεντρώστε προσεκτικά το κυτταρικό σφαιρίδιο και μεταφέρετε το εναιώρημα κυττάρων σε νέες φιάλες που περιέχουν φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
NEDH
Ηλικία δωρητή
666 ημέρες