Премини към съдържанието
INS-1
Тъкан
Панкреас, островчета на Лангерханс
Заболяване
Инсулином на плъх
Синоними
INS1

Документи

INS-1

Cell line · Номер на продукта 300471

The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

Наличността е ниска
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия INS-1 е получена от трансплантируем инсулином, създаден с рентгенови лъчи при плъхове. Тъй като клетките INS-1 съдържат висока концентрация на инсулин и реагират на промени в нивата на глюкозата, те често се използват за изследване на функцията на бета-клетките. Растежът и експресията на хормони зависят от редуциращия агент 2-меркаптоетанол.

INS-1 клетките се отличават с хетерогенност, състояща се от зрели инсулин-позитивни клетки и незрели бихормонални клетки, експресиращи инсулинови и глюкагонови протеини.

Двухормоналните INS-1 клетки имат по-ниска експресия на Nkx6.1 и нямат алфа клетъчни маркери, което показва, че не са напълно узрели. Освен това хроничното стимулиране с глюкоза намалява експресията на инсулинови гени и протеини в клетките INS-1. По този начин се намаляват нивата на инсулина и пептидите, получени от проглюкагон, като GLP-1, GLP-2 и глюкагон.

Тъкан
Панкреас, островчета на Лангерханс
Заболяване
Инсулином на плъх
Синоними
  • INS1

02Класификация

Организъм
Плъх
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Тип клетка
Бета клетка

04Идентификатори

Източник
INS-1 (каталожен номер 300471 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10116
Целозавър
CVCL_0352

05Проява и предразположеност

Продукти
Инсулин, глутатион

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10 % топлинно инактивиран FBS, добавете 2,5 g/L глюкоза и 10 mM HEPES
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Съберете суспендираните клетки в 15-милилитрова епруветка и внимателно промийте прилепналите клетки с PBS без калций и магнезий (използвайте 3-5 ml за колби Т25 и 5-10 ml за колби Т75). Нанесете Accutase (1-2 ml за колби T25 и 2,5 ml за колби T75), като се уверите, че покрива изцяло клетъчния слой. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 10 минути. След инкубацията комбинирайте и центрофугирайте суспензията и адхезивните клетки. След центрофугирането внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета и прехвърлете клетъчната суспензия в нови колби, съдържащи свежа среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
NEDH
Възраст на донора
666 дни