INS-1
Cell line · 製品番号 300471
The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...
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- INS-1Cell line€550.00
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01概要
- 説明
INS-1細胞株は、X線で作成されたラットの移植可能なインスリノーマに由来する。INS-1細胞は高濃度のインスリンを含み、グルコースレベルの変化に反応するため、β細胞の機能を研究するために頻繁に使用される。成長とホルモン発現は還元剤である2-メルカプトエタノールに依存している。
INS-1細胞は、成熟したインスリン陽性細胞と、インスリンとグルカゴンタンパク質を発現する未熟なバイホルモン細胞からなる、その異質性で注目される。
バイホルモンINS-1細胞はNkx6.1の発現が低く、α細胞マーカーを欠くことから、完全に成熟していないことがわかる。さらに、慢性的なグルコース刺激は、INS-1細胞におけるインスリン遺伝子とタンパク質の発現を減少させる。そのため、GLP-1、GLP-2、グルカゴンのようなインスリンおよびプログルカゴン由来ペプチドのレベルは低下する。
- ティッシュ
- 膵臓、ランゲルハンス島
- 病気
- ラットインスリノーマ
- 同義語
- INS1
02分類
- 生物
- ネズミ
- セックス
- 男性
- 成長特性
- アドヘレント
- バイオセーフティレベル
- 1
03特徴
- 細胞の種類
- ベータ細胞
04識別子
- 引用
- INS-1 (Cytion カタログ番号 300471)
- NCBI 納税者番号
- 10116
- セロサウルス
- CVCL_0352
05発現と感受性
- 製品
- インスリン、グルタチオン
06取り扱いと飼育
- 培地
- RPMI1640、w：2.0mM安定グルタミン、w：2.0g/L NaHCO3（Cytion article number 820700a）
- 培養雰囲気
37℃、5%CO2、加湿雰囲気。
- サプリメント
- 培地に10％熱不活性化FBSを添加し、2.5g/Lのグルコースと10mMのHEPESを加える。
- 解離試薬
- アキュターゼ
- 継代培養
- 浮遊細胞を15 mlチューブに集め、カルシウムとマグネシウムを欠いたPBSで付着細胞を穏やかに洗浄する（T25フラスコでは3～5 ml、T75フラスコでは5～10 mlを使用）。アキュターゼ（T25フラスコでは1-2 ml、T75フラスコでは2.5 ml）を、細胞層を完全に覆うように塗布する。細胞を室温で10分間インキュベートする。インキュベーション後、懸濁液と接着細胞の両方を合わせて遠心する。遠心後、細胞ペレットを注意深く懸濁し、細胞懸濁液を新しい培地の入った新しいフラスコに移す。
- 解凍と培養
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07品質管理と凍結保存
- 無菌性
マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。
細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。
- 凍結培地
- 凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地（FBSを含む）＋10％DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1（Cytionカタログ番号800100）を使用している。
- 保管条件
長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。
- 配送条件
凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。
08寄付者
- 品種／亜種
- NEDH
- ドナーの年齢
- 666日
09法務・安全
- 安全上の注意事項
- 将来の融解のためにクライオバイアルを液体窒素に保存する場合、厳格な安全対策を遵守することが必須である。適切な保護手袋と保護衣は不可欠であり、液体窒素タンクへの凍結サンプルの移動中または液体窒素タンクからの凍結サンプルの移動中には、フェイスマスクまたは安全ゴーグルの使用が義務付けられている。これは、凍結試料を取り出す際に、凍結試料が爆発し、鋭利な破片が飛び散って怪我をするリスクを軽減するためである。
- 保証
サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。
詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。
- 物質移転契約書の締結が必要
- はい