INS-1
Cell line · رقم المنتج 300471
The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...
التخصيص / التوصيات
- INS-1Cell line€550.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
يُشتق خط خلايا INS-1 من ورم الأنسولين القابل للزرع في الفئران الذي تم إنشاؤه بالأشعة السينية. ونظراً لاحتواء خلايا INS-1 على تركيز عالٍ من الأنسولين واستجابتها للتغيرات في مستويات الجلوكوز، فإنها كثيراً ما تُستخدم لدراسة وظيفة خلايا بيتا. يعتمد النمو والتعبير الهرموني على العامل المختزل 2-ميركابتويثانول.
وتتميز خلايا INS-1 بعدم تجانسها، حيث تتكون من خلايا ناضجة موجبة للأنسولين وخلايا ثنائية الهرمونات غير الناضجة التي تعبر عن بروتينات الأنسولين والجلوكاجون.
تتميز خلايا INS-1 ثنائية الهرمونات ثنائية الهرمون بانخفاض تعبير Nkx6.1 وتفتقر إلى علامات خلايا ألفا، مما يشير إلى أنها لم تنضج بالكامل. علاوة على ذلك، يقلل التحفيز المزمن للجلوكوز من التعبير الجيني والبروتيني للأنسولين في خلايا INS-1. وعلى هذا النحو، تنخفض مستويات الأنسولين والببتيدات المشتقة من البروجلوكاجون مثل GLP-1 وGLP-2 والجلوكاجون.
- الأنسجة
- البنكرياس، جزر لانجرهانز
- المرض
- ورم الأنسولين في الفئران
- المرادفات
- INS1
02التصنيف
- كائن حي
- الجرذ
- الجنس
- ذكر
- خصائص النمو
- الملتزم
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- نوع الخلية
- خلية بيتا
04المعرّفات
- المرجع
- INS-1 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300471)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 10116
- سيلوصور
- CVCL_0352
05التعبير والقابلية للإصابة
- المنتجات
- الأنسولين، الجلوتاثيون
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- قم بتزويد الوسط ب 10٪ من FBS المعطل حرارياً، وأضف 2.5 جم/لتر جلوكوز و10 ملي مولار هيبيس
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- السلالة / النوع الفرعي
- NEDH
- عمر المتبرع
- 666 يوماً
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم
