INS-1
Cell line · Číslo výrobku 300471
The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...
Přizpůsobení / Doporučení
- INS-1Cell line€550.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buněčná linie INS-1 je odvozena od transplantovatelného inzulinomu vytvořeného rentgenovým zářením u potkanů. Protože buňky INS-1 obsahují vysokou koncentraci inzulinu a reagují na změny hladiny glukózy, často se používají ke studiu funkce beta buněk. Růst a exprese hormonů jsou závislé na redukčním činidle 2-merkaptoethanolu.
Buňky INS-1 se vyznačují heterogenitou, skládají se ze zralých inzulin-pozitivních buněk a nezralých dvouhormonálních buněk exprimujících proteiny inzulinu a glukagonu.
Bi-hormonální buňky INS-1 mají nižší expresi Nkx6.1 a postrádají markery alfa buněk, což naznačuje, že nejsou plně zralé. Chronická stimulace glukózou navíc snižuje expresi inzulínových genů a proteinů v buňkách INS-1. Hladiny inzulinu a peptidů odvozených od proglukagonu, jako jsou GLP-1, GLP-2 a glukagon, jsou proto snížené.
- Tkáň
- Pankreas, Langerhansovy ostrůvky
- Nemoc
- Inzulinom potkana
- Synonyma
- INS1
02Klasifikace
- Organismus
- Krysa
- Sex
- Muž
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Typ buňky
- Beta buňka
04Identifikátory
- Citace
- INS-1 (katalogové číslo Cytion 300471)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0352
05Exprese a náchylnost
- Produkty
- Inzulín, glutathion
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS, přidejte 2,5 g/l glukózy a 10 mM HEPES
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Plemeno / poddruh
- NEDH
- Věk dárce
- 666 dní
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
