INS-1
Cell line · Tuotenumero 300471
The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...
Räätälöinti / Suositukset
- INS-1Cell line€550.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
INS-1-solulinja on peräisin rotilla röntgensäteilyllä aikaansaadusta siirrettävästä insulinoomasta. Koska INS-1-solut sisältävät runsaasti insuliinia ja reagoivat glukoosipitoisuuden muutoksiin, niitä käytetään usein beetasolujen toiminnan tutkimiseen. Kasvu ja hormonin ilmentyminen ovat riippuvaisia pelkistävästä aineesta 2-merkaptoetanolista.
INS-1-solut ovat huomattavan heterogeenisiä, sillä ne koostuvat kypsistä insuliinipositiivisista soluista ja epäkypsistä bi-hormonaalisista soluista, jotka ilmentävät insuliini- ja glukagoniproteiineja.
Bi-hormonaalisilla INS-1-soluilla on vähäisempi Nkx6.1:n ilmentyminen, ja niiltä puuttuvat alfasolujen merkkiaineet, mikä osoittaa, etteivät ne ole täysin kypsyneet. Lisäksi krooninen glukoosistimulaatio vähentää insuliinigeenin ja -proteiinin ilmentymistä INS-1-soluissa. Näin ollen insuliinin ja proglukagonista peräisin olevien peptidien, kuten GLP-1:n, GLP-2:n ja glukagonin pitoisuudet vähenevät.
- Kudos
- Haima, Langerhansin saarekkeet
- Sairaus
- Rotan insulinoma
- Synonyymit
- INS1
02Luokittelu
- Organismi
- Rotta
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Solutyyppi
- Beetasolu
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- INS-1 (Cytionin luettelonumero 300471)
- NCBI-verotunnus
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0352
05Ilmentyminen ja alttius
- Tuotteet
- Insuliini, glutationi
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään väliaine 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä, lisätään 2,5 g/l glukoosia ja 10 mM HEPES
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Rotua / alalajia
- NEDH
- Luovuttajan ikä
- 666 päivää
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
