Prejsť na obsah
INS-1
Tkanivo
Pankreas, Langerhansove ostrovčeky
Choroba
Inzulinóm potkana
Synonymá
INS1

Dokumenty

INS-1

Cell line · Číslo výrobku 300471

The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Nízke zásoby
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia INS-1 je odvodená z röntgenom vytvoreného transplantovateľného inzulinómu u potkanov. Keďže bunky INS-1 obsahujú vysokú koncentráciu inzulínu a reagujú na zmeny hladiny glukózy, často sa používajú na štúdium funkcie beta buniek. Rast a expresia hormónov sú závislé od redukčného činidla 2-merkaptoetanolu.

Bunky INS-1 sú pozoruhodné svojou heterogenitou, pozostávajúcou zo zrelých inzulín-pozitívnych buniek a nezrelých bi-hormonálnych buniek exprimujúcich proteíny inzulínu a glukagónu.

Bi-hormonálne bunky INS-1 majú nižšiu expresiu Nkx6.1 a chýbajú im markery alfa buniek, čo naznačuje, že nie sú úplne zrelé. Okrem toho chronická stimulácia glukózou znižuje expresiu inzulínových génov a proteínov v bunkách INS-1. Hladiny inzulínu a peptidov odvodených od proglukagónu, ako sú GLP-1, GLP-2 a glukagón, sú preto znížené.

Tkanivo
Pankreas, Langerhansove ostrovčeky
Choroba
Inzulinóm potkana
Synonymá
  • INS1

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Typ bunky
Beta bunka

04Identifikátory

Citácia
INS-1 (katalógové číslo Cytion 300471)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0352

05Prejav a náchylnosť

Produkty
Inzulín, glutatión

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelne inaktivovaného FBS, pridajte 2,5 g/l glukózy a 10 mM HEPES
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
NEDH
Vek darcu
666 dní