INS-1
Cell line · Číslo výrobku 300471
The INS-1 cell line is derived from an x-ray-created transplantable insulinoma in rats. Because INS-1 cells contain a high concentration of insulin and re...
Prispôsobenie / Odporúčania
- INS-1Cell line€550.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
Bunková línia INS-1 je odvodená z röntgenom vytvoreného transplantovateľného inzulinómu u potkanov. Keďže bunky INS-1 obsahujú vysokú koncentráciu inzulínu a reagujú na zmeny hladiny glukózy, často sa používajú na štúdium funkcie beta buniek. Rast a expresia hormónov sú závislé od redukčného činidla 2-merkaptoetanolu.
Bunky INS-1 sú pozoruhodné svojou heterogenitou, pozostávajúcou zo zrelých inzulín-pozitívnych buniek a nezrelých bi-hormonálnych buniek exprimujúcich proteíny inzulínu a glukagónu.
Bi-hormonálne bunky INS-1 majú nižšiu expresiu Nkx6.1 a chýbajú im markery alfa buniek, čo naznačuje, že nie sú úplne zrelé. Okrem toho chronická stimulácia glukózou znižuje expresiu inzulínových génov a proteínov v bunkách INS-1. Hladiny inzulínu a peptidov odvodených od proglukagónu, ako sú GLP-1, GLP-2 a glukagón, sú preto znížené.
- Tkanivo
- Pankreas, Langerhansove ostrovčeky
- Choroba
- Inzulinóm potkana
- Synonymá
- INS1
02Klasifikácia
- Organizmus
- Potkan
- Sex
- Muž
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Typ bunky
- Beta bunka
04Identifikátory
- Citácia
- INS-1 (katalógové číslo Cytion 300471)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0352
05Prejav a náchylnosť
- Produkty
- Inzulín, glutatión
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % tepelne inaktivovaného FBS, pridajte 2,5 g/l glukózy a 10 mM HEPES
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Plemeno / poddruh
- NEDH
- Vek darcu
- 666 dní
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno
