KB

KB hücre hattı, başlangıçta ağızdaki epidermal karsinomdan türetildiği düşünülen yapışık bir epitelyal hücre hattıdır. Ancak, izoenzim analizleri, HeLa marker kromozom tanımlaması ve DNA parmak izi dahil olmak üzere daha sonra yapılan analizler, KB hücre hattının aslında HeLa hücreleriyle kontaminasyon yoluyla oluşturulduğunu ortaya koymuştur. Bu yanlış tanımlama, araştırmalarda titiz hücre hattı kimlik doğrulamasının öneminin altını çizmektedir.

KB hücreleri, immünoperoksidaz boyama ile doğrulandığı üzere, epitel hücrelerinde önemli bir yapısal protein olan keratini ifade eder. Ayrıca, viral onkoloji ile ilgili çalışmalarda ilgi çekici olabilecek insan papillomavirüs 18 (HPV-18) dizilerini içerdikleri bulunmuştur. KB hücrelerinin izoenzim profili, HeLa hücrelerinin özellikleriyle tutarlı olarak glukoz-6-fosfat dehidrogenaz (G6PD) tip A içerir. Bu bulgular göz önüne alındığında, KB hücrelerinin HeLa hücreleri ile HeLa'ya özgü işaret kromozomlarının varlığı da dahil olmak üzere birçok biyolojik özelliği paylaştığını kabul etmek kritik önem taşımaktadır.

Sonuç olarak KB hücreleri, özellikle tam hücresel kökenin çok önemli olduğu deneylerde dikkatle kullanılmalıdır. Buna rağmen, epitelyal hücre davranışı, kanser biyolojisi ve viral entegrasyon ve ekspresyon mekanizmalarını incelemek için yararlı bir model olmaya devam etmektedirler. Tüm hücre hatlarında olduğu gibi, KB hücreleri de kesinlikle in vitro araştırmalar için tasarlanmıştır ve terapötik veya in vivo uygulamalar için uygun değildir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın