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KB
Cell line · Número de producto 300446
The KB cell line is an adherent epithelial cell line initially believed to be derived from an epidermal carcinoma of the mouth. However, subsequent analys...
Personalización / Recomendaciones
- KBCell line€430.00
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01Información general
- Descripción
La línea celular KB es una línea celular epitelial adherente que inicialmente se creyó que derivaba de un carcinoma epidérmico de la boca. Sin embargo, análisis posteriores, incluidos ensayos isoenzimáticos, identificación de cromosomas marcadores HeLa y huellas dactilares de ADN, revelaron que la línea celular KB se estableció en realidad por contaminación con células HeLa. Esta identificación errónea subraya la importancia de una rigurosa autentificación de las líneas celulares en la investigación.
Las células KB expresan queratina, una proteína estructural clave en las células epiteliales, como confirma la tinción con inmunoperoxidasa. Además, se ha observado que contienen secuencias del virus del papiloma humano 18 (VPH-18), que pueden ser de interés en estudios relacionados con la oncología vírica. El perfil isoenzimático de las células KB incluye glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD) tipo A, en consonancia con las características de las células HeLa. Dados estos hallazgos, es fundamental reconocer que las células KB comparten muchas propiedades biológicas con las células HeLa, incluida la presencia de cromosomas marcadores específicos de HeLa.
En consecuencia, las células KB deben utilizarse con precaución, sobre todo en experimentos en los que el origen celular exacto es crucial. A pesar de ello, siguen siendo un modelo útil para estudiar el comportamiento de las células epiteliales, la biología del cáncer y los mecanismos de integración y expresión virales. Como ocurre con todas las líneas celulares, las células KB están destinadas estrictamente a la investigación in vitro y no son adecuadas para aplicaciones terapéuticas o in vivo.
- Pañuelo de papel
- Endocervix
- Enfermedad
- Adenocarcinoma
- Sinónimos
- Strain KB
02Clasificación
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Mujer
- Propiedades de crecimiento
- Adherente
- Nivel de bioseguridad
- 1
03Características
- Morfología
- De tipo epitelial
- Tipo de célula
- Epidermoide
- Cariotipo
- 2n = 46
04Identificadores
- Referencia
- KB (número de catálogo 300446 de Cytion)
- N.º de identificación fiscal del NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0372
05Expresión y susceptibilidad
- Isoenzimas
- G6PD, tipo A
- Susceptibilidad a los virus
- Poliovirus 1, adenovirus 3
- Productos
- Queratina
06Manejo y cultivo
- Medio de cultivo
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
- Atmósfera de incubación
37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.
- Suplementos
- Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
- Reactivo de disociación
- Accutase
- Subcultivo
- Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
- Densidad de siembra
- 2 x 104 células/cm2 darán lugar a una monocapa confluente en un plazo de 2 a 3 días.
- Renovación de fluidos
- de 2 a 3 veces por semana
- Recuperación tras la descongelación
- Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Descongelación y cultivo
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Control de calidad y criopreservación
- Esterilidad
La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.
Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Medio de congelación
- Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
- Condiciones de almacenamiento
Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.
- Condiciones de envío
Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.
08Donante
- Edad del donante
- 30 años
- Origen étnico
- Afroamericanos
09Aspectos legales y de seguridad
- Medidas de seguridad
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su futura descongelación, es obligatorio cumplir estrictas medidas de seguridad. Es esencial utilizar guantes y ropa de protección adecuados, así como una mascarilla o gafas de seguridad durante el traslado de muestras congeladas desde o hacia el tanque de nitrógeno líquido. Con ello se pretende mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones crioviales al extraerlas, que pueden dar lugar a la proyección de fragmentos afilados.
- Garantía
En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto
Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía
- Se requiere un acuerdo de transferencia de material
- Sí