الانتقال إلى المحتوى
KB
الأنسجة
باطن عنق الرحم
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
Strain KB

المستندات

KB

Cell line · رقم المنتج 300446

The KB cell line is an adherent epithelial cell line initially believed to be derived from an epidermal carcinoma of the mouth. However, subsequent analys...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط خلايا KB هو خط خلايا ظهارية ملتصقة يُعتقد في البداية أنه مشتق من سرطان بشرة الفم. ومع ذلك، كشفت التحاليل اللاحقة، بما في ذلك فحوصات الإنزيمات المتساوية وتحديد كروموسوم علامة هيلا وتحديد بصمات الحمض النووي، أن خط خلايا KB قد تم إنشاؤه بالفعل من خلال التلوث بخلايا هيلا. يؤكد هذا التحديد الخاطئ للهوية على أهمية التوثيق الدقيق لخط الخلايا في الأبحاث.

تعبّر خلايا KB عن الكيراتين، وهو بروتين هيكلي رئيسي في الخلايا الظهارية، كما تم تأكيد ذلك من خلال تلوين إنزيم الأكسيد المناعي. بالإضافة إلى ذلك، تم العثور على أنها تحتوي على تسلسلات من فيروس الورم الحليمي البشري 18 (HPV-18)، والتي قد تكون ذات أهمية في الدراسات المتعلقة بالأورام الفيروسية. يتضمن ملف تعريف الإنزيم المتساوي الإنزيم لخلايا KB إنزيم الجلوكوز 6 فوسفات نازعة الهيدروجين (G6PD) من النوع A، بما يتوافق مع خصائص خلايا هيلا. وبالنظر إلى هذه النتائج، من المهم إدراك أن خلايا KB تشترك في العديد من الخصائص البيولوجية مع خلايا HeLa، بما في ذلك وجود كروموسومات علامة خاصة بخلايا HeLa.

ونتيجة لذلك، يجب استخدام خلايا KB بحذر، خاصةً في التجارب التي يكون فيها الأصل الخلوي الدقيق أمرًا بالغ الأهمية. وعلى الرغم من ذلك، تظل هذه الخلايا نموذجًا مفيدًا لدراسة سلوك الخلايا الظهارية وبيولوجيا السرطان وآليات التكامل والتعبير الفيروسي. وكما هو الحال مع جميع خطوط الخلايا، فإن خلايا كيه بي مخصصة فقط للأبحاث المختبرية وليست مناسبة للتطبيقات العلاجية أو في الجسم الحي.

الأنسجة
باطن عنق الرحم
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
  • Strain KB

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
البشرة
النمط الكروموسومي
2n = 46

04المعرّفات

المرجع
ك.ب (رقم الكتالوج سايتون 300446)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0372

05التعبير والقابلية للإصابة

الإيزوزيمات
G6PD، النوع A
قابلية الإصابة بالفيروس
فيروس شلل الأطفال 1، الفيروس الغدي 3
المنتجات
الكيراتين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
2 × 104 خلية/سم² ستؤدي إلى طبقة أحادية متقاربة في غضون 2 إلى 3 أيام.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
30 سنة
الأصل العرقي
أمريكي من أصل أفريقي