KB

KB-cellinjen är en adherent epitelial cellinje som ursprungligen antogs härröra från ett epidermalt karcinom i munnen. Efterföljande analyser, inklusive isoenzymassays, identifiering av HeLa-markörkromosomer och DNA-fingeravtryck, visade dock att KB-cellinjen i själva verket etablerades genom kontaminering med HeLa-celler. Denna felidentifiering understryker vikten av rigorös autentisering av cellinjer inom forskningen.

KB-celler uttrycker keratin, ett viktigt strukturellt protein i epitelceller, vilket bekräftas genom immunoperoxidasfärgning. Dessutom har de visat sig innehålla sekvenser från humant papillomvirus 18 (HPV-18), vilket kan vara av intresse i studier relaterade till viral onkologi. KB-cellernas isoenzymprofil omfattar glukos-6-fosfatdehydrogenas (G6PD) typ A, vilket överensstämmer med egenskaperna hos HeLa-celler. Med tanke på dessa resultat är det viktigt att inse att KB-celler delar många biologiska egenskaper med HeLa-celler, inklusive närvaron av HeLa-specifika markörkromosomer.

Därför bör KB-celler användas med försiktighet, särskilt i experiment där det exakta cellulära ursprunget är avgörande. Trots detta är de fortfarande en användbar modell för att studera epitelcellers beteende, cancerbiologi och mekanismerna för virusintegration och -uttryck. Som med alla cellinjer är KB-celler endast avsedda för in vitro-forskning och är inte lämpliga för terapeutiska eller in vivo-tillämpningar.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring