Перейти до вмісту
KB
Тканина
Ендоцервікс
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
Strain KB

Документи

KB

Cell line · Номер товару 300446

The KB cell line is an adherent epithelial cell line initially believed to be derived from an epidermal carcinoma of the mouth. However, subsequent analys...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія KB - це адгезійна епітеліальна клітинна лінія, яку спочатку вважали похідною епідермальної карциноми ротової порожнини. Однак подальші аналізи, включаючи ізоферментні аналізи, ідентифікацію маркерної хромосоми HeLa та ДНК-дактилоскопію, показали, що клітинна лінія KB насправді була отримана шляхом контамінації з клітинами HeLa. Ця помилкова ідентифікація підкреслює важливість ретельної автентифікації клітинних ліній у дослідженнях.

Клітини KB експресують кератин, ключовий структурний білок епітеліальних клітин, що було підтверджено імунопероксидазним забарвленням. Крім того, було виявлено, що вони містять послідовності вірусу папіломи людини 18 (ВПЛ-18), що може становити інтерес для досліджень, пов'язаних з вірусною онкологією. Ізоферментний профіль клітин KB включає глюкозо-6-фосфатдегідрогеназу (G6PD) типу A, що відповідає характеристикам клітин HeLa. Враховуючи ці дані, важливо визнати, що клітини KB мають багато спільних біологічних властивостей з клітинами HeLa, включаючи наявність HeLa-специфічних маркерних хромосом.

Як наслідок, KB-клітини слід використовувати з обережністю, особливо в експериментах, де точне клітинне походження має вирішальне значення. Незважаючи на це, вони залишаються корисною моделлю для вивчення поведінки епітеліальних клітин, біології раку, механізмів інтеграції та експресії вірусів. Як і всі клітинні лінії, клітини KB призначені виключно для досліджень in vitro і не підходять для терапевтичного застосування або використання in vivo.

Тканина
Ендоцервікс
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
  • Strain KB

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епідермоїдний
Каріотип
2n = 46

04Ідентифікатори

Посилання
KB (номер за каталогом 300446)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0372

05Експресія та сприйнятливість

Ізоферменти
G6PD, тип A
Вразливість до вірусів
Поліовірус 1, аденовірус 3
Продукція
Кератин

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
2 x 104 клітин/см2 призведе до утворення злитого моношару протягом 2–3 днів.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
30 років
Етнічна приналежність
Афроамериканець