KB
Cell line · Varenummer 300446
The KB cell line is an adherent epithelial cell line initially believed to be derived from an epidermal carcinoma of the mouth. However, subsequent analys...
Tilpasning / Anbefalinger
- KBCell line€430.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
KB-cellelinjen er en adhærent epitelcellelinje, som man oprindeligt troede stammede fra et epidermalt karcinom i munden. Efterfølgende analyser, herunder isoenzym-assays, identifikation af HeLa-markørkromosomer og DNA-fingeraftryk, afslørede imidlertid, at KB-cellelinjen faktisk blev etableret gennem kontaminering med HeLa-celler. Denne fejlidentifikation understreger vigtigheden af streng autentificering af cellelinjer i forskning.
KB-celler udtrykker keratin, et vigtigt strukturelt protein i epitelceller, hvilket bekræftes af immunoperoxidasefarvning. Derudover har de vist sig at indeholde sekvenser fra human papillomavirus 18 (HPV-18), som kan være af interesse i studier relateret til viral onkologi. KB-cellernes isoenzymprofil omfatter glucose-6-phosphat dehydrogenase (G6PD) type A, hvilket er i overensstemmelse med HeLa-cellernes karakteristika. På baggrund af disse fund er det vigtigt at erkende, at KB-celler deler mange biologiske egenskaber med HeLa-celler, herunder tilstedeværelsen af HeLa-specifikke markørkromosomer.
Derfor skal KB-celler bruges med forsigtighed, især i eksperimenter, hvor den nøjagtige cellulære oprindelse er afgørende. På trods af dette er de stadig en nyttig model til at studere epitelcellers adfærd, kræftbiologi og mekanismerne for virusintegration og -ekspression. Som med alle cellelinjer er KB-celler udelukkende beregnet til in vitro-forskning og er ikke egnede til terapeutiske eller in vivo-anvendelser.
- Væv
- Endocervix
- Sygdom
- Adenokarcinom
- Synonymer
- Strain KB
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epidermoid
- Karyotype
- 2n = 46
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- KB (Cytion katalognummer 300446)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0372
05Udtryk og modtagelighed
- Isoenzymer
- G6PD, type A
- Virusfølsomhed
- Poliovirus 1, adenovirus 3
- Produkter
- Keratin
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Såtæthed
- 2 x 104 celler/cm2 vil resultere i et sammenhængende monolag inden for 2 til 3 dage.
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- 30 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Afroamerikaner
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja
.jpg)