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Cell line · 제품 번호 300446

The KB cell line is an adherent epithelial cell line initially believed to be derived from an epidermal carcinoma of the mouth. However, subsequent analys...

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01일반 정보

설명

KB 세포주는 처음에는 구강 표피암종에서 유래한 것으로 추정되는 부착성 상피 세포주입니다. 그러나 동종 효소 분석, HeLa 마커 염색체 식별, DNA 지문 분석 등의 후속 분석을 통해 KB 세포주가 실제로는 HeLa 세포에 오염되어 확립된 것으로 밝혀졌습니다. 이러한 오인은 연구에서 엄격한 세포주 인증의 중요성을 강조합니다.

KB 세포는 상피 세포의 핵심 구조 단백질인 케라틴을 발현하는 것으로 면역 산화 효소 염색을 통해 확인되었습니다. 또한 바이러스 종양학 관련 연구에서 관심을 가질 수 있는 인유두종바이러스 18(HPV-18)의 서열을 포함하고 있는 것으로 밝혀졌습니다. KB 세포의 동종 효소 프로필에는 HeLa 세포의 특성과 일치하는 글루코스-6-포스페이트 탈수소효소(G6PD) A형이 포함되어 있습니다. 이러한 결과를 고려할 때, KB 세포는 HeLa 특이적 마커 염색체의 존재를 포함하여 HeLa 세포와 많은 생물학적 특성을 공유한다는 사실을 인식하는 것이 중요합니다.

따라서 KB 세포는 특히 정확한 세포 기원이 중요한 실험에서 신중하게 사용해야 합니다. 그럼에도 불구하고 상피 세포의 행동, 암 생물학, 바이러스 통합 및 발현 메커니즘을 연구하는 데 유용한 모델로 남아 있습니다. 모든 세포주와 마찬가지로 KB 세포는 시험관 내 연구용으로만 사용되며 치료용 또는 생체 내 응용 분야에는 적합하지 않습니다.

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02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사
세포 유형
표피
염색체형
2n = 46

04식별자

인용
KB(사이티온 카탈로그 번호 300446)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_0372

05발현 및 감수성

이소효소
G6PD, A형
바이러스 감수성
소아마비 바이러스 1, 아데노바이러스 3
제품
케라틴

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
2 x 10⁴ 세포/cm²는 2~3일 이내에 융합 단일층을 형성합니다.
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
30년
민족
아프리카계 미국인