.jpg)
KB
Cell line · Nomor produk 300446
The KB cell line is an adherent epithelial cell line initially believed to be derived from an epidermal carcinoma of the mouth. However, subsequent analys...
Penyesuaian / Rekomendasi
- KBCell line€430.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Garis sel KB adalah garis sel epitel yang melekat yang awalnya diyakini berasal dari karsinoma epidermal mulut. Namun, analisis selanjutnya, termasuk uji isoenzim, identifikasi kromosom penanda HeLa, dan sidik jari DNA, mengungkapkan bahwa garis sel KB sebenarnya dibuat melalui kontaminasi dengan sel HeLa. Kesalahan identifikasi ini menggarisbawahi pentingnya otentikasi garis sel yang ketat dalam penelitian.
Sel-sel KB mengekspresikan keratin, protein struktural utama dalam sel epitel, seperti yang dikonfirmasi oleh pewarnaan imunoperoksidase. Selain itu, sel KB ditemukan mengandung sekuens dari human papillomavirus 18 (HPV-18), yang mungkin menarik untuk diteliti dalam studi yang berkaitan dengan onkologi virus. Profil isoenzim sel KB termasuk glukosa-6-fosfat dehidrogenase (G6PD) tipe A, konsisten dengan karakteristik sel HeLa. Dengan adanya temuan ini, sangat penting untuk mengenali bahwa sel KB memiliki banyak kesamaan sifat biologis dengan sel HeLa, termasuk adanya kromosom penanda spesifik HeLa.
Oleh karena itu, sel KB harus digunakan dengan hati-hati, terutama dalam eksperimen yang memerlukan asal sel yang tepat. Meskipun demikian, sel KB tetap menjadi model yang berguna untuk mempelajari perilaku sel epitel, biologi kanker, dan mekanisme integrasi dan ekspresi virus. Seperti halnya semua garis sel, sel KB hanya ditujukan untuk penelitian in vitro dan tidak cocok untuk aplikasi terapeutik atau in vivo.
- Tisu
- Endoserviks
- Penyakit
- Adenokarsinoma
- Sinonim
- Strain KB
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Jenis sel
- Epidermoid
- Kariotipe
- 2n = 46
04Pengidentifikasi
- Referensi
- KB (Nomor katalog Cytion 300446)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0372
05Ekspresi dan kerentanan
- Isoenzim
- G6PD, tipe A
- Kerentanan terhadap virus
- Virus polio 1, virus adenovirus 3
- Produk
- Keratin
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Kepadatan penanaman
- 2 x 10⁴ sel/cm² akan menghasilkan lapisan tunggal yang padat dalam waktu 2 hingga 3 hari.
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 30 tahun
- Etnis
- Afrika-Amerika
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya