12Z

La lignée cellulaire 12Z est un modèle de cellules épithéliales endométriosiques humaines immortalisées, dérivées de lésions endométriosiques péritonéales. Elle a été initialement établie par transfection de cellules épithéliales endométriosiques primaires avec l’antigène T majeur du SV40, ce qui lui confère une capacité de prolifération prolongée. Les cellules 12Z sont positives à la cytokératine et négatives à l’E-cadhérine, ce qui les caractérise comme une population de type épithélial présentant un phénotype invasif. Il a été démontré que ces cellules présentent un comportement hautement migratoire et invasif in vitro, semblable à celui des cellules de carcinome métastatique, et qu’elles expriment la N-cadhérine, une cadhérine associée à une invasivité et une motilité accrues. Ce profil moléculaire justifie leur utilisation dans l’étude des mécanismes d’invasion liés à l’endométriose et des parallèles observés en biologie du cancer.

Sur le plan fonctionnel, les cellules 12Z expriment des gènes impliqués dans la signalisation des œstrogènes et de la progestérone, le remodelage de la matrice extracellulaire, l’angiogenèse, la production de cytokines, ainsi que la biosynthèse et la signalisation de la prostaglandine E2 (PGE2). Elles présentent une activité accrue des métalloprotéinases matricielles MMP-2 et MMP-9, qui jouent un rôle essentiel dans la dégradation des composants de la matrice extracellulaire et facilitent l’invasion tissulaire. De plus, les cellules 12Z produisent des niveaux élevés de PGE2, un médiateur inflammatoire impliqué dans la physiopathologie de l’endométriose. Ces caractéristiques, combinées à leur réactivité aux hormones stéroïdes, font des cellules 12Z un modèle in vitro efficace pour analyser les fondements moléculaires de l’établissement des lésions endométriosiques, de leur invasion et de leur régulation hormonale.

Il est important de noter que de récentes études de contrôle de la qualité ont confirmé l’authenticité génétique des cellules 12Z grâce au profilage des STR (répétitions en tandem courtes), dissipant ainsi les inquiétudes antérieures concernant la contamination croisée et les erreurs d’identification dans la recherche sur l’endométriose. Ces cellules, ainsi que la lignée Z11 qui leur est étroitement apparentée, ont été proposées comme modèles standard pour améliorer la reproductibilité et la fiabilité dans le domaine de la biologie de la reproduction et de la recherche sur l’endométriose.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.