12Z

A 12Z sejtvonal egy immortalizált humán endometriózisos epithelsejtmodell, amely peritoneális endometriózisos elváltozásokból származik. Eredetileg primer endometriózisos epitélsejtek SV40 nagy T antigénnel történő transzfektálásával hozták létre, ami lehetővé tette a kiterjesztett proliferációs képességet. A 12Z sejtek citokeratin-pozitívak és E-kadherin-negatívak, ami megkülönbözteti őket egy epithelszerű, invazív fenotípusú populációként. Kimutatták, hogy ezek a sejtek in vitro nagymértékű migrációs és invazív viselkedést mutatnak, hasonlóan az áttétes karcinóma sejtekhez, és N-kadherint expresszálnak, egy olyan kaderint, amely fokozott invazivitással és motilitással jár együtt. Ez a molekuláris profil alátámasztja az endometriózis szempontjából releváns inváziós mechanizmusok tanulmányozására való felhasználásukat, és a rákbiológiában megfigyelhető párhuzamokat.

Funkcionálisan a 12Z sejtek olyan géneket expresszálnak, amelyek részt vesznek az ösztrogén és progeszteron jelátvitelben, az extracelluláris mátrix átalakításában, az angiogenezisben, a citokintermelésben, valamint a prosztaglandin E2 (PGE2) bioszintézisében és jelátvitelében. Fokozott aktivitást mutatnak az MMP-2 és MMP-9 mátrix metalloproteinázok esetében, amelyek kritikus szerepet játszanak az extracelluláris mátrix komponensek lebontásában és a szöveti invázió elősegítésében. Továbbá a 12Z sejtek nagy mennyiségű PGE2-t termelnek, amely gyulladásos mediátor, és szerepet játszik az endometriózis patofiziológiájában. Ezek a tulajdonságok, valamint a szteroid hormonokra való érzékenységük a 12Z sejteket hatékony in vitro modellé teszik az endometriózisos elváltozások kialakulásának, az inváziónak és a hormonális szabályozásnak a molekuláris alapjainak feltárására.

Fontos, hogy a közelmúltban végzett minőségellenőrzési vizsgálatok megerősítették a 12Z sejtek genetikai hitelességét STR (rövid tandemismétlődés) profilalkotással, ami enyhíti a keresztkontaminációval és a téves azonosítással kapcsolatos korábbi aggodalmakat az endometriózis-kutatásban. Ezeket a sejteket, valamint a közeli rokon Z11 vonalat a reprodukciós biológia és az endometriózis-kutatás területén a reprodukálhatóság és a megbízhatóság javítására szolgáló standard modellként javasolták.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban