12Z

A linha celular 12Z é um modelo de células epiteliais endometrióticas humanas imortalizadas derivadas de lesões endometrióticas peritoneais. Foi originalmente estabelecida através da transfecção de células epiteliais endometrióticas primárias com o antigénio SV40 large T, permitindo uma capacidade proliferativa alargada. As células 12Z são positivas para a citoqueratina e negativas para a E-caderina, o que as distingue como uma população de tipo epitelial com um fenótipo invasivo. Foi demonstrado que estas células apresentam um elevado comportamento migratório e invasivo in vitro, semelhante ao das células de carcinoma metastático, e expressam N-caderina, uma caderina associada a uma maior invasividade e motilidade. Este perfil molecular apoia a sua utilização no estudo dos mecanismos de invasão relevantes para a endometriose e os paralelos observados na biologia do cancro.

Funcionalmente, as células 12Z expressam genes envolvidos na sinalização de estrogénio e progesterona, remodelação da matriz extracelular, angiogénese, produção de citocinas e biossíntese e sinalização da prostaglandina E2 (PGE2). Apresentam uma atividade elevada das metaloproteinases da matriz MMP-2 e MMP-9, que são essenciais para a degradação dos componentes da matriz extracelular e facilitam a invasão dos tecidos. Além disso, as células 12Z produzem níveis elevados de PGE2, um mediador inflamatório implicado na fisiopatologia da endometriose. Estas caraterísticas, juntamente com a sua capacidade de resposta às hormonas esteróides, fazem das células 12Z um modelo in vitro eficaz para dissecar os fundamentos moleculares do estabelecimento da lesão endometriótica, da invasão e da regulação hormonal.

É importante notar que estudos recentes de controlo de qualidade confirmaram a autenticidade genética das células 12Z através de perfis STR (short tandem repeat), atenuando as preocupações anteriores sobre a contaminação cruzada e a identificação incorrecta na investigação da endometriose. Estas células, juntamente com a linha Z11, intimamente relacionada, foram propostas como modelos padrão para melhorar a reprodutibilidade e a fiabilidade no domínio da biologia reprodutiva e da investigação da endometriose.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia