Prejsť na obsah
12Z
Tkanivo
Endometrium, epitel
Choroba
Endometrióza
Synonymá
12z, 12-Z, Z12, Z-12, Z12 Eo, EEC12Z

Dokumenty

12Z

Cell line · Číslo výrobku 305733

The 12Z cell line is an immortalized human endometriotic epithelial cell model derived from peritoneal endometriotic lesions. It was originally establishe...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia 12Z je imortalizovaný model ľudských endometriotických epitelových buniek odvodených z peritoneálnych endometriotických lézií. Pôvodne bola vytvorená transfekciou primárnych endometriotických epitelových buniek antigénom SV40 large T, čo umožnilo rozšírenú proliferačnú schopnosť. Bunky 12Z sú cytokeratín-pozitívne a E-kadherín-negatívne, čo ich odlišuje ako epiteliálnu populáciu s invazívnym fenotypom. Ukázalo sa, že tieto bunky vykazujú vysokú mieru migrácie a invazívneho správania in vitro, podobne ako bunky metastatického karcinómu, a exprimujú N-kadherín, kadherín spojený so zvýšenou invazívnosťou a pohyblivosťou. Tento molekulárny profil podporuje ich použitie pri štúdiu mechanizmov invázie relevantných pre endometriózu a paralel pozorovaných v biológii rakoviny.

Funkčne bunky 12Z exprimujú gény zapojené do signalizácie estrogénov a progesterónu, remodelácie extracelulárnej matrix, angiogenézy, produkcie cytokínov a biosyntézy a signalizácie prostaglandínu E2 (PGE2). Vykazujú zvýšenú aktivitu matrixových metaloproteináz MMP-2 a MMP-9, ktoré sú rozhodujúce pre degradáciu zložiek extracelulárnej matrix a uľahčujú inváziu do tkaniva. Okrem toho bunky 12Z produkujú vysoké hladiny PGE2, zápalového mediátora, ktorý sa podieľa na patofyziológii endometriózy. Tieto vlastnosti spolu s ich reaktivitou na steroidné hormóny robia z buniek 12Z účinný in vitro model na rozbor molekulárnych základov vzniku endometriotických lézií, invázie a hormonálnej regulácie.

Dôležité je, že nedávne štúdie kontroly kvality potvrdili genetickú pravosť buniek 12Z prostredníctvom profilovania STR (krátke tandemové opakovania), čím sa zmiernili predchádzajúce obavy z krížovej kontaminácie a nesprávnej identifikácie vo výskume endometriózy. Tieto bunky spolu s úzko príbuznou líniou Z11 boli navrhnuté ako štandardné modely na zlepšenie reprodukovateľnosti a spoľahlivosti v oblasti reprodukčnej biológie a výskumu endometriózy.

Tkanivo
Endometrium, epitel
Choroba
Endometrióza
Synonymá
  • 12z
  • 12-Z
  • Z12
  • Z-12
  • Z12 Eo
  • EEC12Z

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This cell line contains an SV40 Large T Antigen expression construct delivered via a pcDNA3.1 vector, enabling extended proliferation through p53 and Rb inactivation. The insert is integrated into the human endometriotic cell line 12Z. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelová bunka
Doba zdvojnásobenia
31 hodín

04Identifikátory

Citácia
12Z (katalógové číslo Cytion 305733)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0Q73

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Hustota výsevu
1–3 x 104 buniek/cm2
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
37 rokov